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主题：【求助】标准曲线的配制-逐级稀释？

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dadgoh
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2018/3/17 17:04:27 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
根据最后所需浓度。由储备液稀释到一个合适浓度，再由这个浓度稀释出所需各点浓度。
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zyl3367898
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2018/3/17 22:07:17 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼上的这个方法也很好。
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yinxaoxao
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2018/3/18 17:28:30 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
尽量减少稀释，买一个刻度小的移液枪，稀释越多误差存在也多；或者购买标准溶液浓度低的；
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yayicuo
v3253952
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2018/3/20 18:03:22 14楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家的方法蛮好，也蛮实用。但是CNAS-CL01-A002中要求要逐级稀释的呀。
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荆棘鸟
zongguitang
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2018/3/20 18:20:51 15楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 雨木霖(mickeylin) 发表:
我习惯的逐级稀释，一般是100稀释到50，然后50稀释到25，然后25稀释到12.5，再从12.5稀释到6.25.。。
假定100为起始浓度，稀释到50时有一次吸取和定容误差，如果再用50的稀释到25，又会产生一次吸取和定容误差，总共就是两次；如果直接用100配置25，只有一次吸取和定容误差。这样不同的配制方法产生误差是不一样的，如果依次从上一级浓度逐级稀释，越到后面的低点，误差越大。个人观点。
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zhao1hao2985
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2018/3/21 11:22:14 16楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看你的定容体积和取液量来决定配置方法。
首先，一个共识大家应该有，过小的移液体积所产生的误差会比大体积的移液误差大。比如你用1ml刻度移液管移取0.1ml所产生的相对误差会大于移取1ml。
        个人不建议使用1ml以下的取样体积，因为相对误差会比较大。
这样就好区分了。你100ppm的溶液稀释成1ppm的。这种情况下，如果你的定容体积只有10ml。那你的吸液量只有0.1ml。那么误差就可能较大。但是如果你定容体积是100ml甚至500ml那你直接稀释误差就小。
另外就是大浓度跨度的稀释。比如1000ppm的标液，稀释成10ppb的溶液。那这个稀释你直接稀释的话，所需的溶液体积就太大了，尤其是有机操作，会浪费大量溶剂。所以肯定是梯度稀释。
所以直接稀释还是梯度稀释选择是个伪命题。一定要根据实际需求来决定。几条个人总结的原则：
1. 根据自己需求的样品量选择，如果直接稀释所需溶剂太多，浪费太多就梯度稀释。
2. 根据移取液体量决定，如果稀释所需移取的样品量过小，那么就选择梯度稀释。

该帖子作者被版主 mickeylin加 5积分， 2经验，加分理由：非常有道理
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gc825
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2018/3/21 15:17:30 17楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一楼的说法
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wazcq
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2018/3/21 15:24:55 18楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zhao1hao2985(zhao1hao2985) 发表:
看你的定容体积和取液量来决定配置方法。
首先，一个共识大家应该有，过小的移液体积所产生的误差会比大体积的移液误差大。比如你用1ml刻度移液管移取0.1ml所产生的相对误差会大于移取1ml。
        个人不建议使用1ml以下的取样体积，因为相对误差会比较大。
这样就好区分了。你100ppm的溶液稀释成1ppm的。这种情况下，如果你的定容体积只有10ml。那你的吸液量只有0.1ml。那么误差就可能较大。但是如果你定容体积是100ml甚至500ml那你直接稀释误差就小。
另外就是大浓度跨度的稀释。比如1000ppm的标液，稀释成10ppb的溶液。那这个稀释你直接稀释的话，所需的溶液体积就太大了，尤其是有机操作，会浪费大量溶剂。所以肯定是梯度稀释。
所以直接稀释还是梯度稀释选择是个伪命题。一定要根据实际需求来决定。几条个人总结的原则：
1. 根据自己需求的样品量选择，如果直接稀释所需溶剂太多，浪费太多就梯度稀释。
2. 根据移取液体量决定，如果稀释所需移取的样品量过小，那么就选择梯度稀释。

有道理！想问下如果是纯物质来配标液那么纯物质至少取多少呢？比如色谱纯的苯配制100ppm苯的二硫化碳溶液
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zhao1hao2985
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2018/3/21 16:18:44 19楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wazcq(wazcq) 发表:
有道理！想问下如果是纯物质来配标液那么纯物质至少取多少呢？比如色谱纯的苯配制100ppm苯的二硫化碳溶液


纯物质基本都是称量法。这个取决于你天平的精确度。但液体的标液很难称量。只能用微量注射器取一点点然后称量，但说实话液体样本来就难称，尤其是易挥发的液体。你还是用二硫化碳这种高挥发的溶剂。说实话我以前还真配过这个东西。自己心里都没谱，不过当时配的少，所以误差会比较大。
放一个空的容量瓶，快速滴几微升苯看下重量，再计算下100ppm需要多少微升。比如50ul。
然后再取50ul左右，快速滴进新的容量瓶盖塞子，记重量。别忘了之前就要把塞子放在天平上。然后马上用二硫化碳稀释。
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qqqid
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2018/3/22 10:32:24 20楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
逐级稀释，说的是稀释倍数很大的情况，不能一次直接稀释到很低的浓度，要分多个步骤稀释，一般一步稀释10倍，最大不能超过100倍。
稀释标准曲线时，没有“级别”一说，浓度“级别”是有些色谱工作站中的说法。
稀释标准曲线时，较低浓度的标准点用上一个标准点稀释，这种做法是错误的，误差会累积，最小浓度点误差最大。
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