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液相色谱（LC）

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主题：【求助】反冲液相C18色谱柱

浏览0 回复14 电梯直达

椰子

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发表于：2018/12/05 10:28:48 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

反冲c18柱，要注意哪些，冲的时间一般多久，流速控制在多少，用哪些溶剂冲洗比较好。我清洗柱子一般用甲醇。。老师们，给点宝贵的意见。??

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2018/12/5 10:35:45 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你是色谱柱堵了么？

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言逊

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2018/12/5 10:38:30 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你先看看你的色谱柱适不适合反冲，反冲也只是去除留在柱头的杂质，如果你的柱子不适合反冲，你反冲的话会迅速降低柱效的，要谨慎操作！

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初心

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2018/12/5 10:44:53 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

反冲要慎重，流速不能过高，0.5ml/min，柱子如果没有用到缓冲盐，纯甲醇低流速冲洗60min左右，不要接检测器，柱子出口直接连到废液瓶

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言逊

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2018/12/5 10:48:45 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一些反冲色谱柱的方法：
一：如果是已经保存好的色谱柱：1.反向接柱，先用 95%水：5%乙腈 0.2 ml/min，冲 20 倍柱体积；然后用四氢呋喃，0.2 ml/min，冲 20 倍柱体积；最后用 95%乙腈：5%水，0.2 ml/min，冲 20 倍柱体积；2.正向接柱，用 65%乙腈水保存色谱柱。
二：如果是刚走完样的色谱柱，那么请按照下列步骤进行：1.卸掉保护柱 2.正向接柱，常规方法冲洗色谱柱（先 95水，后 95 乙腈或甲醇）；3.反向接柱，先用 95%水：5%乙腈 0.2 ml/min，冲 20 倍柱体积；然后用四氢呋喃，0.2 ml/min，冲 20 倍柱体积；最后用 95%乙腈：5%水，0.2ml/min，冲 20 倍柱体积；4.正向接柱，用 65%乙腈水保存色谱柱。
最终的保存条件可以参考色谱柱说明书进行调整。

注：1. 20 倍柱体积：250?4.6mm 大概 80ml；150?4.6mm 大概 48ml
2.反向接柱时不要接检测器！

如果友友的检测物质比较脏，建议还是增加保护柱的使用。反冲有风险，使用需谨慎（不得万不得已，不要反冲。）

该帖子作者被版主 bingwang228加 2积分， 2经验，加分理由：经验分享

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