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主题：【原创】诊断试剂中用到的Good''s缓冲剂有哪些？

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2019/12/13 13:57:13 21楼管理分享正序浏览只看楼主回复私聊

需要注意的是，在配置缓冲液时，温度需要控制在20℃，按比例配置的是大致的pH，如果需要调整到特定的pH值，需要采用pH计来调整加入Bicine、EPPS或者氢氧化钠溶液的量。

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2019/12/5 16:29:17 20楼管理分享正序浏览只看楼主回复私聊

配置缓冲液时，溶液中如果要去除钠离子，则可以用氢氧化钾代替氢氧化钠使用

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2019/11/26 10:52:08 19楼管理分享正序浏览只看楼主回复私聊

EPPS缓冲液的配制方法
(1)配0.1M溶液(A): EPPS 25.233g/去离子水 1,000ml
(2)配0.1M NaOH溶液(B):NaOH 4g/去离子水 1,000ml
(3)pH 5.2 1,000ml(A) 0ml(B) (A):(B)=5:0
pH 7.3 1,000ml(A) 200ml(B) (A):(B)=5:1
pH 7.8 1,000ml(A) 400ml(B) (A):(B)=5:2
pH 8.2 1,000ml(A) 600ml(B) (A):(B)=5:3
pH 8.8 1,000ml(A) 800ml(B) (A):(B)=5:4

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2019/11/14 9:23:18 18楼管理分享正序浏览只看楼主回复私聊

Bicine缓冲液的配制方法 1-2L
(1)配0.1M溶液(A): Bicine 16.317g/去离子水 1,000ml
(2)配0.1M NaOH溶液(B):NaOH 4g/去离子水 1,000ml
(3)pH 5.1 1,000ml(A) 0ml(B) (A):(B)=5:0
pH 7.8 1,000ml(A) 200ml(B) (A):(B)=5:1
pH 8.2 1,000ml(A) 400ml(B) (A):(B)=5:2
pH 8.6 1,000ml(A) 600ml(B) (A):(B)=5:3
pH 10.4 1,000ml(A) 800ml(B) (A):(B)=5:4

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2019/10/12 16:16:33 17楼管理分享正序浏览只看楼主回复私聊

根据实验的不同，HEPES buffer缓冲液的配制方法也有差异。通常有HEPES配合氢氧化钠NaOH，HEPES 盐。
配制HEPES的Stock solution 时，先讲HEPES 称重溶于蒸馏水，然后用0.5-1M的NaOH调节pH，需注意有效的pH缓冲范围是6.8-8.2，然后蒸馏水定容，4℃保存。
配制HEPES缓冲盐溶液时，则需加入氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、葡聚糖等，同样用NaOH来调节pH，最后定容低温保存。

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nphfm20111977

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2019/9/10 22:50:09 16楼管理分享正序浏览只看楼主回复私聊

没有使用过

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2019/9/5 11:59:26 15楼管理分享正序浏览只看楼主回复私聊

三羟甲基氨基甲烷，简称Tris，实验室还经常叫做氨丁三醇或者氨基定三醇，在电流滴定法测定蛋白质中的巯基时，通常使用Tris缓冲剂。
由于络合反应的K稳非常大，反应迅速完全，终点突跃十分明显，勿需绘制滴定曲线即可确定终点。

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2019/8/30 9:42:34 14楼管理分享正序浏览只看楼主回复私聊

在Folin酚法检测蛋白含量时通常用EPPS（HEPPS）作缓冲剂。Folin—酚试剂法是由测定蛋白质浓度的基本方法，在生物化学领域得到广泛的应用。
Folin酚法的显色原理与双缩脲方法是相同的（但EPPS不能用于缩二脲/双缩脲）检测，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。

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2019/8/20 9:36:01 13楼管理分享正序浏览只看楼主回复私聊

3-（环己胺）-1-丙磺酸CAPS是一种应用广泛的缓冲剂，也叫N-环己基-3-氨基丙磺酸。很多生物试验以及生化试剂盒里都会用到。
现在蛋白质的PVDF转膜已经不用Tris-gly、SDS、20%甲醇缓冲液，因为缓冲液中有甘氨酸，所以测序的时候很难区分甘氨酸是Buffer带进去还是蛋白质本身的，现在测序用的转膜缓冲液是10mM/1CAPS10%甲醇，CAPS电印记缓冲液中的甲醇浓度范围是0~20%，一般甲醇浓度高的缓冲液对低分子量蛋白质的转移效果好，而甲醇浓度低甚至不含甲醇的缓冲液则有利于高分子量蛋白的转移。

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