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主题：【求助】GBT22388测三聚氰胺HPLC法样品处理问题

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发表于：2019/05/10 16:22:20 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天第一次试作奶粉，用GBT22388法测三聚氰胺HPLC法样品处理的时候， 经离心后样品是清液，但是用经三氯乙酸液润湿的滤纸过滤后滤液反而变浑浊 ，一会儿还有沉淀。过净化柱也非常困难。所有的操作和药品的配制全是按标准进行，没有错误和污染。不知道有什么原因。 谢谢大家！
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2019/5/10 19:20:07 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
三氯乙酸（TCA）与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:? ①?在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐.?②?作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,?暴露出较多的疏水性基团,?使之聚集沉淀。如果在离心前放置时间过长，可能导致断裂造成沉淀消失。在过滤时蛋白质又与润湿用的TCA发生反应，导致混浊。你可以尝试前处理时尽快离心，看看是否有改善。
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