标准储备液是2mg/ml,需要稀释成2ug/ml的工作液,即稀释1000倍,有多种办法,哪种误差比较小呢?
有以下几种方案,我通过计算对比一下:
方案A.移液管移取1ml定容于1000ml容量瓶
方案B.移液管移取1ml定容于10ml容量瓶,再用移液管从中取1ml定容于100ml
方案C.移液管移取1ml定容于20ml容量瓶,再用移液管从中取1ml定容于50ml
方案D.移液管移取10ml定容于200ml容量瓶,再用移液管从中取10ml定容于500ml
方案E.
移液枪移取100ul定容于10ml容量瓶,再用移液管从中取1ml定容于10ml
方案F.
移液枪移取100ul定容于100ml容量瓶
方案G.
移液枪移取1000ul定容于1000ml容量瓶
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GBT12806-2011里有容量瓶的允差范围,GBT12808-2015里有单标线移液管的允差范围,JJG646-2006里有
移液枪的允差范围,涉及到的量器允差如下:
移液管1ml±0.007ml(0.7%),10ml±0.020ml(0.2%)
移液枪100ul±2ul(2%),1000ul±10ul(1%)
容量瓶10ml±0.020ml(0.2%),20ml±0.03ml(0.15%),50ml±0.05ml(0.1%),100ml±0.10ml(0.1%),200ml±0.15ml(0.075%),500ml±0.25ml(0.05%),1000ml±0.40ml(0.04%)
工作液浓度=储液浓度×(V1/V2)×(V3/V4),V1和V3是移液管移入体积,V2和V4是容量瓶定容体积(如果是一步稀释到位,没有V3V4)
由于误差的传递,可直接计算出各种方案配出的工作液浓度对期望浓度的相对误差。
方案A. 0.7%+0.04%=0.74%
方案B. 0.7%+0.2%+0.7%+0.1%=1.7%
方案C. 0.7%+0.15%+0.7%+0.1%=1.65%
方案D. 0.2%+0.075%+0.2%+0.05%=0.525%
方案E. 2%+0.2%+0.7%+0.2%=3.1%
方案F. 2%+0.1%=2.1%
方案G. 1%+0.04%=1.04%
可见,方案D相对误差是最小的,其次是方案A,最差是方案E。
结论:工作液浓度误差和你选用的量器误差有着直接关系,分级稀释并不一定比直接稀释效果好。而且从上述对比可看出,
移液枪带来的误差还是比较大的。
移液枪主要特点是方便,多次移液平行性好,但对比移液管,
移液枪的系统误差还是比较大,好在
移液枪可修正体积,一定要经常校正。
另外,由于水和有机溶剂性质不同,用水校正的
移液枪拿来吸取相同体积的有机溶剂,会明显感觉到体积不对,而且头一次吸取有机溶剂会发现在不停的“漏液”,这是因为有机溶剂挥发造成枪头液面蒸汽压偏大,把液体压出枪头导致的,多润洗几次就好了。可见用
移液枪吸取有机溶剂带来的误差要比移液管大不少呢。再者,从成本角度考虑,分级稀释可以大大减少溶剂使用量,例如方案A需要用1000ml的溶剂,而方案C却需要70ml,方案E只需要20ml。