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主题：【已应助】液相色谱出现负峰

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ivanleo
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发表于：2019/11/12 11:05:26 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
真心求助各位专家，本人使用agilent1290超高效液相自带的1.8um，2.1x100mmC18柱进行三聚氰胺测定，机器柱子都是新的，一直使用色谱纯的甲醇作为流动相，样品最终也用甲醇溶解，测定前充分排气，但是总是在出峰前出现负峰。使用标准品进行测定，标准品也用甲醇溶解，进样后负峰消失，反而在标准品峰前出现连续杂峰，整个色谱图很不好看，请问该如何解决
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2019/11/12 11:27:09 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先说标准品出峰前出现杂峰：有以下两种可能：1.可能是溶剂和流动相的影响，排除办法：进一阵纯甲醇，也就是溶解样品的溶剂试一下，如果没有出峰基线良好，说明不是溶剂和柱子以及仪器的影响。2.排除上述原因之后，再进标准品看是否是标准品中的杂质，验证方法：从小浓度进到大浓度，若杂峰峰面积和三聚氰胺的面积一样随浓度增大而增大，说明杂峰是对应标准品中的杂质。
    再说样品出现倒峰的问题：有以下三种可能：1.可能是样品处理中引入的其他溶剂的溶剂峰（因不清楚你具体处理方法，验证也无法说明）。2.可能是样品中的杂质对应的色谱峰。有些物质有可能比溶剂的吸光度还要弱，或者对应杂质在检测波长下吸光度比参比波长下吸光度弱，所以当一定浓度的这样的物质流出时，出现倒峰这种情况是正常的。
    希望我的回答对你有所帮助。
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