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主题：【已应助】请教：HPLC 样品检测出峰问题？

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chunmeimei
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发表于：2019/12/01 14:42:03 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
新药分析 梯度洗脱出峰时间提前至5分钟左右出峰

各位前辈，我最近接到一项新的实验，委托方提供的方法是甲醇：水=10:90，我们的液相色谱是反向色谱，C18柱 250mm*5mm  4.6um。由于该方法出峰时间长，理论塔板数低（三千八至四千左右），我将其方法换为乙腈，梯度洗脱（10%-30%-10%：0min-8min-12min-15min stop），出峰时间提前至5分钟左右，TP一万多，但是出峰前会上升类似于漂移，但出峰完基线在十分钟左右才开始正常漂移，峰不拖尾。请教大家如何解决?由于是新药，我们不知道其化学结构。
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2019/12/1 14:42:26 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
走梯度，流动相比例变化较剧烈的时候，基线会略有上漂。可以试试适当调低8min时乙腈比例，或调长乙腈达30%时所需时间。
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