主题:【求助】菜鸟级人物寻求帮助!!!!-关于梯度洗脱

浏览0 回复14 电梯直达
sherry_xu
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刚入门不久,正从基本知识开始看,在梯度洗脱这里看不懂了,知道梯度洗脱的大概含义,和气象中的程序升温原理一样。但是我想知道是每次检测都需要梯度洗脱呢?还是隔多长时间一次呢?
我看资料说,梯度洗脱后一定要对色谱柱进行再生处理,这是为什么呢?

ps:我看了论坛里好多梯度洗脱的内容,但还是一头雾水,希望能人给我一点指示。万分感谢!!!!
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Easy-Boy
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一般情况下,高效液相只有在使用等度(即不变的溶剂配比)时不能分离目标物,才会使用梯度(变化的溶剂配比)洗脱。你冲过植化的手填柱吗?就是换种溶剂把前面那种溶剂冲不下来的物质冲下来,就是梯度洗脱。
sherry_xu
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十分感谢,我现在是一个初级入门者,还没有开始接触液相呢,只是在了解一些基本的知识,这个论坛给了我很大的帮助。
suelly94406
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一般多组分分析时,多个样品由于极性不同,在等度条件下,要么分离不好,要么运行时间过长,这时可采用梯度洗脱,即流动相水相与有机相的配比随着时间而改变,增加有机相的配比,这样可改善分离和减少运行时间.不过每走完一个梯度还需要把配比初始成开始的比例.平衡一段时间再走下一个样.
茅茅
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原文由 sherry_xu 发表:
刚入门不久,正从基本知识开始看,在梯度洗脱这里看不懂了,知道梯度洗脱的大概含义,和气象中的程序升温原理一样。但是我想知道是每次检测都需要梯度洗脱呢?还是隔多长时间一次呢?
我看资料说,梯度洗脱后一定要对色谱柱进行再生处理,这是为什么呢?

ps:我看了论坛里好多梯度洗脱的内容,但还是一头雾水,希望能人给我一点指示。万分感谢!!!!


只要能分离开,推荐用等度洗脱。而且不一定要对色谱柱再生处理的。
yzfc2008
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maples
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在对等度进行充分了解并操作后,再去看梯度的资料和方法就很容易理解了,不要着急,一点点来
蛋神
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我简单的理解就是变换组成,使流动相极性变化,将分离的效果提高。
杜宇
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原文由 ngipwa 发表:
我简单的理解就是变换组成,使流动相极性变化,将分离的效果提高。
俺同意
wjl0220
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可以根据你所需要的,如果需要向后拖,就增加水的含量,如果想提前就增加有机相的含量。
linwl
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流动相的组成就是无机相和有机相的混合溶液,等度洗脱就是一直保持流动相的固有比例,梯度洗脱就是在洗脱的过程中使有机相的比例逐渐增多或是呈阶段性增加。做分离用的树脂柱需要再生使用,但是做分析用的这种反相硅胶柱不需要再生,只要用过之后将他保存在有机相中就可以了。
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