主题:【已应助】关于液相色谱冲洗液的选择

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sunka5724
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LC,所测试的物质不溶于水,溶于甲苯甲醇等有机溶剂,并且所测物质为两种物质的混合物,这两种物质均是已知且拥有的,可以分别对这两种物质进行打谱。我想要知道这混合物中这两种物质的相对浓度,求解具体选用什么冲洗液比较合适,什么比例?谢谢各位!
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sunka5724
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看样子用常规的水、甲醇两组分即可,有必要的话再上乙腈;
先通过保留时间调好合适的流动相,如果只有两组分的话,先配个二者1:1的混合液(甲醇溶液),然后用甲醇:水 = 50:50冲洗柱子,上样,观察保留时间,然后调节流动相比例(保留时间短,区分度低就调高水比例;保留时间长,就调低水的比例),最终达到满足区分度前提下保留时间短一些(保留时间不是很重要,区分度重要),确定流动相组成和比例。
用该分离条件分别做确定浓度两单组份的HPLC(如最终目的只是简单比较两组分比例,那测个点就可以算浓度/面积比;如最终要确定两组分各自浓度,就要做两条工作曲线~~)以及待测样的HPLC。
最好找个有经验的人带一下,夏天湿度大,HPLC容易出各种各样小问题...
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