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主题：【已应助】同一个样品用两种液相色谱条件检测的结果不一致？怎么回事？

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发表于：2020/02/23 11:42:01 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
同一个样品两种方法检测结果不一致
请教大家，同一个样品用两种液相色谱条件检测的结果不一致（归一化法），一个色谱条件是乙腈-0.1%磷酸=40:60，主峰保留时间为4min，杂质A 含量约0.15%。另一个是乙腈-水（0.4%HAC，0.1%TEA）=44:56，主峰为16min，采集时间足够长，完全可以检测到A，但是杂质A 没有出峰。柱子都是C18柱，牌子不一样。
另一个问题，做旋光测试时，同一份样品用两根长度不一样的旋光管，测出来结果偏差比较大，可能是什么原因？另外，同一批样品，配制两份溶液，旋光值测出来也不一样，为什么呢？
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2020/2/23 11:42:14 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
个人认为是因为楼主所用的流动相不同导致杂质未检出。
添加无机酸磷酸的流动相本身紫外吸收比较弱，故能看到较小的杂质（0.15%），但换为添加有机酸（HAC）碱（TEA）后的流动相，本身紫外吸收增强了很多，可能会掩盖小杂质的检出，也就是说该杂质的检测限变高了，所以看不到。
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