主题:【已应助】高效液相流动相含磷酸水,如何进行冲柱

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Ins_3ec84f82
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水相为0.1-0.3磷酸水,每次重新开机后先100%有机相和90%有机相各冲半小时活化柱子,之后就开始把纯水换成磷酸水平衡跑样品了,结束后换上纯水,10%有机相1.5h,90%有机相1h,最后100%有机相20min,这样做有问题吗?流速都是1ml/min
推荐答案:Insm_603a714c回复于2022/01/10
一般色谱柱不要用纯水冲

活化不需要这么久,改为原先时间的一半足以

色谱柱的保存溶剂和洗柱溶剂可以根据色谱柱说明书来优化(有条件的话)

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Insm_603a714c
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一般色谱柱不要用纯水冲

活化不需要这么久,改为原先时间的一半足以

色谱柱的保存溶剂和洗柱溶剂可以根据色谱柱说明书来优化(有条件的话)

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2022/1/10 16:06:43 Last edit by Insm_603a714c
初心
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普通的色谱柱最好不要进纯水,建议直接10有机相冲洗
valorb
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Ins_3ec84f82
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没有纯水冲柱哦。我是在开机之后,先100%甲醇冲柱半小时,再是90%甲醇,也就是10%水冲半个小时。结束后也是分别用10% 90% 100% 甲醇来冲柱封柱的。
Ins_3ec84f82
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原文由 Ins_3ec84f82(Ins_3ec84f82) 发表:没有纯水冲柱哦。我是在开机之后,先100%甲醇冲柱半小时,再是90%甲醇,也就是10%水冲半个小时。结束后也是分别用10% 90% 100% 甲醇来冲柱封柱的。
因为我要用磷酸水,所以我都是在活化柱子时水相用纯水,之后再用磷酸水替换掉纯水的,结束跑样开始冲柱时也是重新把磷酸水换成水。
dadgoh
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冲柱流速可降低一些,增加冲洗溶剂对填料的浸润作用。
有水有渝
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直接先用有机相和纯水分别排气,之后就开始把纯水换成磷酸水平衡跑样品了;实验结束后10%有机相1h,最后100%有机相45min,这样就可以了。如果下次分析有问题再延长清洗时间
Ins_3ec84f82
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:直接先用有机相和纯水分别排气,之后就开始把纯水换成磷酸水平衡跑样品了;实验结束后10%有机相1h,最后100%有机相45min,这样就可以了。如果下次分析有问题再延长清洗时间
嗯嗯。那使用前不用活化柱子吗?而且我以为用酸之前和之后都要用10%有机相冲洗一段时间的?
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