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主题：【已应助】【求助】中药丸剂提取物对内标测定有抑制作用？中药浓度越高，外加的内标的峰面积却越低？

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发表于：2022/03/26 20:40:30 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
【求助】中药丸剂提取物对内标测定有抑制作用？中药浓度越高，外加的内标的峰面积却越低？
我把研究的中药丸剂粉末用甲醇超声，离心，取上清，浓度分别为0.4mg/ml,0.2mg/ml,0.1mg/ml;然后取1ul该提取液加入49ul水（相当于我正式实验的一个酶反应体系，所以现在先用水代替一下），再加入200ul含有内标氯雷他定10ng/ml的多潘立酮，离心进液质。结果发现峰面积从14000,上升到了17000。我后来又换用了氯雷他定作为内标，后来两个内标一起用。怕有残留，所以我从低浓度组做到高浓度组，从高浓度组做到低浓度组都试过，最后的结果都是中药浓度越高，内标峰面积越小。也稍微尝试了将中药浓度稍微下调几倍，仍然是这种结果，但是可能变化趋势会小一点。难道我只能这样，不断减小中药浓度来使得内标稳定吗？可是等我正式实验的时候，中药的浓度太低，对我的正式实验的酶反应体系可能无法发挥效果？求助大家，实验室没有人遇到过这种问题，中药浓度越高，内标峰面积越小。
推荐答案：歌名回复于2022/03/28
液质样本的基质效应比较强，很容易出现这个情况，你可以正常做酶反应的时候还是按照你正常的浓度添加做就可以，最后处理好的样本，稀释倍数大一点后在添加内标上机测定就好了，这样可以不影响不得酶反应浓度要求也降低了样本基质对内标响应的影响。
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2022/3/28 11:01:12 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
液质样本的基质效应比较强，很容易出现这个情况，你可以正常做酶反应的时候还是按照你正常的浓度添加做就可以，最后处理好的样本，稀释倍数大一点后在添加内标上机测定就好了，这样可以不影响不得酶反应浓度要求也降低了样本基质对内标响应的影响。
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2022/3/28 18:31:28 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
中药基质成分复杂，可能有较强的基质效应，所以首选同位素内标
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