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液相色谱（LC）

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主题：【求助】色谱柱孔径和粒径的区别

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Insm_af467669

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发表于：2022/04/24 14:31:54 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱柱孔径和粒径的区别，比如粒径是3um，孔径100A，这两个参数分别是什么意思呢，为什么有的柱子不标孔径，有的却标识呢

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JOE HUI

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2022/4/24 16:51:40 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

楼主，3UM是色谱填料粒径，10A是色谱填料孔径。

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JOE HUI

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2022/4/24 16:54:11 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 JOE HUI(xurunjiao5339) 发表:楼主，3UM是色谱填料粒径，10A是色谱填料孔径。

粒径，影响色谱分离度。粒径越小，分离越快，柱效越高，但柱压力越高，柱容易被污染，导致柱寿命降低。常见分析柱通常使用5um填料，复杂的多组分样品分离一般使用3.5um粒径，更大内径的制备色谱柱通常使用更大的粒径。如果固定相选择是正确，但是分离度不够，那么选用更小的粒度的填料是很有用的。3.5um填料填充柱的柱效比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%;然而，3.5um的色谱柱的背压却是5um的2倍，因此如何选择填料粒径需要根据现实情况而定。
孔径小，则含孔率高，比表面积大，载碳量高;色谱柱填料孔径大小需和分子大小相匹配，保证分子自由进出填料孔并与孔内表面的键合相进行分离分配，通常要求孔径直径是分子直径的3倍以上，一般小分子使用80—120A，大分子使用300A。

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wuyuzegang

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2022/4/24 18:22:49 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

粒径是硅胶球的直径，孔径是指硅胶球上小孔的直径。但这个小孔是不穿过球体的，只是球上凹进去的一块。可以简单想成高尔夫球的样子。样品分子进入这个小孔，在小孔内被键合的烷基吸附，然后出来有快有慢，达到分离的目的。

粒径影响涡流扩散相，粒径越小涡流扩散相越小，柱效越高，粒径与柱效近似成反比；粒径越小，压力也越大，压力与粒径的平方成反比。如何选择填料粒径需要根据现实情况而定。

孔径是一个平均值。常规的液相色谱柱都是在硅胶表面健合特定的官能团，孔径的大小影响官能团健合的密度。同等粒径的硅胶，孔径越大，硅胶的比表面积越小，硅胶表面健合的官能团密度越低，也就是C%越低；反之，孔径越小，比表面积越大，官能团健合的密度越高。通常要求孔径直径是分子直径的3倍以上，一般小分子使用80—120A，如果用来分离生物大分子，就要选择孔径较大的(例如300A)的填料，这样才会得到充分的保留。

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2022/4/24 18:37:29 Last edit by dahua1981

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2022/4/24 18:38:53 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

孔径指的是填料上面微孔的大小，粒径是填料颗粒的直径。填料的粒径对柱效有直接的影响作用。

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hnteng

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2022/4/24 22:07:27 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱柱中填的是多孔颗粒。孔径就是内部孔的直径，粒径就是整个球形粒子的直径。

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myoldid

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2022/4/25 9:20:21 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

按字面意思，粒径就是硅胶球这一坨的直径，类似高尔夫球的直径，孔径是指硅胶球上洞洞的直径。类似高尔夫球上坑的直径
填料孔径的首要选择条件是基于要分析的分子的大小。典型的小分子可以很容易地扩散到标准 80-120?孔径填料中以及从其中扩散，但多肽和蛋白质可能不会在这种小孔径填料中扩散。鉴于此，建议使用 300?孔径填料（300SB）对多肽和蛋白质进行等度或梯度洗脱分离。