紫外可见分光光度计(UV)

主题:【已应助】总氮空白吸光度3点多 而且一直跳

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Ins_39aef03b
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请问 我做总氮实验
1.比色皿 比色管都用1+9盐酸泡了 水用的是哇哈哈  高压锅虽然和微生物用的是同一个,但也重洗过 。
2.分光光度计比色时 ,纯水较零可以。但是测空白吸光度就是3.4到3.5之间一直跳。
3.不光是空白 我重新配的曲线 和一个水样、质控 这几个点都是吸光度3.4-3.5之间跳。
4.用的是默克的过硫酸钾 后来用的是科密欧环保定制级的也这样。
5.紫外分光光光度计售后工程师来看说仪器没问题。
6.我现在崩溃的点是我之前做准过。空白吸光度在0.030.而且是用纯水机里的水做的。质控也可以准,曲线也配过。上一次做总氮实验是去年12月份,因为这个项目实验少,今年四月才又有总氮实验,但就做不准了。来回已经从重新配试剂开始做一套好几次了,都一样情况。
7.做其他日常生产项目的同事都没有这个情况

  所以我还能注意哪点?哪地方我再改进一下呢? 请大神们赐教。谢谢了??
推荐答案:ztyzb回复于2022/05/06
楼主,其实你只要找出空白问题所在一切就可以解决了,单纯空白加试剂验证即可,个人提供思路,不过首先保证楼主上述的问题波长是A220,以下也通过A220验证。
1、单纯娃哈哈可以调零,测一下消解后娃哈哈吸光值,看是否为器皿或者灭菌锅问题;
2、娃哈哈调零后测试娃哈哈单纯加过硫酸钾的吸光值,可以同步测消解前和消解后,至于体积保证前后一致即可不用非得定容;
3、同样验证单纯加氢氧化钠;
4、同样验证单纯加盐酸。
因为个人猜测大概率是试剂的问题,而且就是过硫酸钾,因为进口的也会失效,按理说上述步骤就能排查出来了。
还有个思路,如果做标曲的话参照硝酸盐氮的方法(HJ/T 346-2007)用硝酸盐氮的标准溶液只加盐酸(注意不加过硫酸钾)不消解就可以绘制标曲,如果楼主这样成功了就说明了肯定是碱性过硫酸钾的问题。
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ztyzb
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楼主,其实你只要找出空白问题所在一切就可以解决了,单纯空白加试剂验证即可,个人提供思路,不过首先保证楼主上述的问题波长是A220,以下也通过A220验证。
1、单纯娃哈哈可以调零,测一下消解后娃哈哈吸光值,看是否为器皿或者灭菌锅问题;
2、娃哈哈调零后测试娃哈哈单纯加过硫酸钾的吸光值,可以同步测消解前和消解后,至于体积保证前后一致即可不用非得定容;
3、同样验证单纯加氢氧化钠;
4、同样验证单纯加盐酸。
因为个人猜测大概率是试剂的问题,而且就是过硫酸钾,因为进口的也会失效,按理说上述步骤就能排查出来了。
还有个思路,如果做标曲的话参照硝酸盐氮的方法(HJ/T 346-2007)用硝酸盐氮的标准溶液只加盐酸(注意不加过硫酸钾)不消解就可以绘制标曲,如果楼主这样成功了就说明了肯定是碱性过硫酸钾的问题。
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2022/5/6 20:00:53 Last edit by zxz19900120
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原文由 ztyzb(zxz19900120) 发表:楼主,其实你只要找出空白问题所在一切就可以解决了,单纯空白加试剂验证即可,个人提供思路,不过首先保证楼主上述的问题波长是A220,以下也通过A220验证。1、单纯娃哈哈可以调零,测一下消解后娃哈哈吸光值,看是否为器皿或者灭菌锅问题;2、娃哈哈调零后测试娃哈哈单纯加过硫酸钾的吸光值,可以同步测消解前和消解后,至于体积保证前后一致即可不用非得定容;3、同样验证单纯加氢氧化钠;4、同样验证单纯加盐酸。因为个人猜测大概率是试剂的问题,而且就是过硫酸钾,因为进口的也会失效,按理说上述步骤就能排查出来了。还有个思路,如果做标曲的话参照硝酸盐氮的方法(HJ/T 346-2007)用硝酸盐氮的标准溶液只加盐酸(注意不加过硫酸钾)不消解就可以绘制标曲,如果楼主这样成功了就说明了肯定是碱性过硫酸钾的问题。
谢谢您。现在知道啥问题了。是盐酸的问题……
Insp_1839c805
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原文由 Ins_39aef03b(Ins_39aef03b) 发表:谢谢您。现在知道啥问题了。是盐酸的问题……
盐酸问题的原因
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