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紫外可见分光光度计（UV）

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主题：【已应助】总氮空白吸光度3点多而且一直跳

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发表于：2022/05/06 16:17:30 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

请问我做总氮实验
1.比色皿比色管都用1+9盐酸泡了水用的是哇哈哈高压锅虽然和微生物用的是同一个，但也重洗过。
2.分光光度计比色时，纯水较零可以。但是测空白吸光度就是3.4到3.5之间一直跳。
3.不光是空白我重新配的曲线和一个水样、质控这几个点都是吸光度3.4-3.5之间跳。
4.用的是默克的过硫酸钾后来用的是科密欧环保定制级的也这样。
5.紫外分光光光度计售后工程师来看说仪器没问题。
6.我现在崩溃的点是我之前做准过。空白吸光度在0.030.而且是用纯水机里的水做的。质控也可以准,曲线也配过。上一次做总氮实验是去年12月份，因为这个项目实验少，今年四月才又有总氮实验，但就做不准了。来回已经从重新配试剂开始做一套好几次了，都一样情况。
7.做其他日常生产项目的同事都没有这个情况

所以我还能注意哪点？哪地方我再改进一下呢？请大神们赐教。谢谢了??

推荐答案：ztyzb回复于2022/05/06

楼主，其实你只要找出空白问题所在一切就可以解决了，单纯空白加试剂验证即可，个人提供思路，不过首先保证楼主上述的问题波长是A220，以下也通过A220验证。
1、单纯娃哈哈可以调零，测一下消解后娃哈哈吸光值，看是否为器皿或者灭菌锅问题；
2、娃哈哈调零后测试娃哈哈单纯加过硫酸钾的吸光值，可以同步测消解前和消解后，至于体积保证前后一致即可不用非得定容；
3、同样验证单纯加氢氧化钠；
4、同样验证单纯加盐酸。
因为个人猜测大概率是试剂的问题，而且就是过硫酸钾，因为进口的也会失效，按理说上述步骤就能排查出来了。
还有个思路，如果做标曲的话参照硝酸盐氮的方法（HJ/T 346-2007）用硝酸盐氮的标准溶液只加盐酸（注意不加过硫酸钾）不消解就可以绘制标曲,如果楼主这样成功了就说明了肯定是碱性过硫酸钾的问题。

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2022/5/6 20:00:05 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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2022/5/6 20:00:53 Last edit by zxz19900120

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2022/6/10 16:39:40 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 ztyzb(zxz19900120) 发表:楼主，其实你只要找出空白问题所在一切就可以解决了，单纯空白加试剂验证即可，个人提供思路，不过首先保证楼主上述的问题波长是A220，以下也通过A220验证。1、单纯娃哈哈可以调零，测一下消解后娃哈哈吸光值，看是否为器皿或者灭菌锅问题；2、娃哈哈调零后测试娃哈哈单纯加过硫酸钾的吸光值，可以同步测消解前和消解后，至于体积保证前后一致即可不用非得定容；3、同样验证单纯加氢氧化钠；4、同样验证单纯加盐酸。因为个人猜测大概率是试剂的问题，而且就是过硫酸钾，因为进口的也会失效，按理说上述步骤就能排查出来了。还有个思路，如果做标曲的话参照硝酸盐氮的方法（HJ/T 346-2007）用硝酸盐氮的标准溶液只加盐酸（注意不加过硫酸钾）不消解就可以绘制标曲,如果楼主这样成功了就说明了肯定是碱性过硫酸钾的问题。

谢谢您。现在知道啥问题了。是盐酸的问题……

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