主题：【原创】【仪器心得】赛默飞Q-Exactive Orbitrap液质联用仪使用心得

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Haibarason

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发表于：2022/05/13 14:53:23 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一、品牌简介
赛默飞世尔公司（Thermo Fisher Scientific）长期以来一直在仪器行业处于领导者地位，其前身为成立于1956年的热电公司(Thermo Electron Corporation)，总部位于美国马萨诸塞州。赛默飞世尔致力于帮助客户使世界更健康，更清洁，更安全。公司年营业收入超过200亿美元，在全球拥有约65,000名员工。主要客户类型包括医药和生物公司，医院和临床诊断实验室，大学、科研院所和政府机构，以及环境与工业过程控制装备制造商等。

二、设备性能介绍
Thermo Scientific Q-Exactive 组合型四极杆Orbitrap 质谱仪，能够快速可靠地对更多化合物进行鉴定、定量测定和确认。本台式 LC-MS/MS 系统将四极杆母离子选择与高分辨率准确质量数（HRAM）Orbitrap 检测相结合，提供出色性能和多功能性。Q-Exactive 质谱仪特别适用于非目标或目标化合物筛查，也能够实现广泛的定性和定量应用，可广泛用于药物发明、蛋白质组学、环境和食品安全、临床研究和法医毒理学。

图1. Thermo Q-Exactive 四极杆轨道离子阱质谱仪外观

图2.设备拆卸维护图

图3.离子源维护

★技术特点
1.HRAM 和全扫描能力可以自始至终捕获所有样品数据，从而实现回顾性数据分析而无需再次扫描样品
2.分辨率高达 140,000 FWHM，可消除同量异序同分异构化合物的干扰，在分析复杂基质中的样品时，提高结果可靠性
3.全扫描和全离子裂解 (AIF) 模式的质量准确度均优于 1 ppm，可以确保可靠的化合物鉴定
4.12 hz 的快速扫描和光谱多通路技术特别适合 UHPLC 应用
5.快速极性切换可以获得尽可能多的信息
6.AIF 和多种解离技术——源内 CID 和 HCD，可以辅助化合物鉴定
7.扩展的质量数范围达到 6000 m/z，可以提高对单电荷小分子和生物分子的检测能力
8.超过四个数量级的扫描动态范围以及飞克级灵敏度，可以在一次扫描中同时检测痕量级和高丰度化合物

★主要领域及优势
·更加可靠地应用于药物发明和代谢组学研究
1.和三重四极杆质谱相当的定量能力不仅可用于定量分析母体化合物和代谢物，而且在识别确定化合物同时提供更高通量
2.快速 HRAM Orbitrap 技术可以消除干扰，实现高可靠性的代谢物结构鉴定，并可对代谢组学和脂质组学样品进行大规模谱图分析
3.MS 和 MS/MS 模式中均可进行现快速“扫描到扫描”极性切换，可以在单次进样中完成尽可能多的代谢物检测和鉴定
·获得更多蛋白质组学信息
1.与 CID 相比，HCD 进行更出色的裂解并获得更高质量的 MS/MS 谱图，从而提高鉴定能力
2.高谱图质量和宽动态范围可以对其他仪器无法发现的蛋白质进行鉴定和定量测定。
3.定量/定性分析能力使蛋白质组学发现实验轻松转换为目标蛋白质定量分析
·高度特异性的环境和食品安全分析
1.由于该质谱仪的特异性超过三重四极杆 Q-TOF 或 Q-Trap 的水平，使其成为定量/定性筛查平台的首选
2.数据依赖的全扫描 MS/MS 能力及 HRAM 数据确保每次鉴定都具有极高可靠性
3.为临床研究和法医毒理学的定量确证提供高度可靠性
4.SRM 与 HRAM 功能结合在一起，使得能够以高度可靠性轻松定量测定内源性类固醇、违禁药物和镇痛剂。

★用于提高通量的应用特定软件
Thermo Scientific? ExactFinder?、LCQuan?、Mass Frontier?、MetQuest?、MetWorks?、SIEVE? 和 TraceFinder? 软件可用于加速数据分析。

三、使用心得
本人研究生期间的方向为脂质组学技术应用，主要做鞘脂类的液质分析方法。当时经常与学院中心实验室的这台仪器打交道，所以比较了解。可以说，没有它我就无法顺利毕业。以下简单分享一些经验心得。
1.配备的液相为Dionex Ultimate 3000型超高效液相色谱仪，模块上有触摸屏，配备触控笔。自动进样器是圆形分3个区域（蓝、绿、红），变色龙软件的操作界面很简洁很漂亮，操作简单，与安捷伦的MassHunter的风格不太一样。
2.当时做组学，定性、定量基本都涉及，定性时采用Full MS扫描模式，QE的灵敏度十分高，浓度低的碎片基本都能扫到；定量的话分两种方法，一种是Full MS模式扫描后，用官方数据库LipidSearch进行匹配再分析；另一种方法是选择平行反应监测模式（PRM）靶向扫描，然后用TraceFinder软件自建数据进行定量，结果相比更准。我后期主要做鞘脂，所以方法2用的多。
3.QE是高分辨质谱，相比QQQ和Q-TOF等，QE的调谐周期比较长，m/z能精确到后四位，检测结果比较稳定。质量分析器Orbitrap结构紧凑、体积小，几乎无需维护，这一点很方便。除常规ESI离子源以外，可选择搭配MALDI源做质谱成像。
4.QE的功能很强大，很多还有待开发，3年来其实我也只学到了皮毛，知道怎么配流动相、操作软件、处理数据、冲洗保护柱子等等。学无止境，仍需努力。