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主题：【已应助】泰乐菌素HPLC有两个峰

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Ins_d97bd62c
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发表于：2022/05/30 14:20:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做实验发现用国标鸡组织中的泰乐菌素检测方法，跑出来的结果有两个峰，各位大佬怎么解决这个问题呢
推荐答案：xiaolanzi5回复于2022/05/31
泰乐菌素在酸性条件，特别是ph小于4下，容易水解生成脱碳霉糖泰乐菌素，水解物出峰在前，母体出峰在后。有可能您的标品中本身就含有代谢产物，建议用液质看看，判断一下。
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2022/5/30 18:40:55 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、色谱柱填充物是不是有塌方或者断裂；
2、进样系统是不是在操作时候响应几回；
还有可能是你的样品在处理过程中出现问题：
1、样品在溶剂中降解了；
2、样品在衍生或者做化学标记等时候反应没有完全，形成几种化合物
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wuyuzegang
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2022/5/30 19:10:38 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
泰乐菌素组分 照高效液相色谱法（附录32页）试验。

　　色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以2mol/L高氯酸钠溶液（用1mol/L盐酸溶液调节pH值至2.5+0.1）-乙腈（60：40）为流动相；检测波长为280nm。理论板数按泰乐菌素A组分峰计算不低于2000，泰乐菌素D峰和泰乐菌素A峰的分离度不得小于2.0，拖尾因子不得过1.5。

　　测定法 取本品与泰乐菌素标准品各30mg，精密称定，分别置100ml量瓶中，加甲醇10ml溶解，用水稀释至刻度。分别精密量取20ul，注入高效液相色谱仪，记录色谱图至泰乐菌素A保留时间的1.5倍。泰乐菌素有关组分的相对保留时间依次约为：泰乐菌素C为0.5，泰乐菌素B为0.7，泰乐菌素D为0.9，泰乐菌素A为1。按峰面积归一化法计算，含泰乐菌素A应不低于80%，泰乐菌素A、B、C、D之和应不低于95%。

注意最后1句，泰乐菌素A、B、C、D之和应不低于95%。

根据上面的材料泰乐菌素似乎包括好几种。可以看一下标准品的说明是不是可能存在其他同分异构体的可能。
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xiaolanzi5
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2022/5/31 9:40:55 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
泰乐菌素在酸性条件，特别是ph小于4下，容易水解生成脱碳霉糖泰乐菌素，水解物出峰在前，母体出峰在后。有可能您的标品中本身就含有代谢产物，建议用液质看看，判断一下。
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2022/5/31 13:11:26 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:泰乐菌素在酸性条件，特别是ph小于4下，容易水解生成脱碳霉糖泰乐菌素，水解物出峰在前，母体出峰在后。有可能您的标品中本身就含有代谢产物，建议用液质看看，判断一下。
您好我想问下这个有文献支持吗？您能说的再详细些吗？
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2022/5/31 13:12:37 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:泰乐菌素在酸性条件，特别是ph小于4下，容易水解生成脱碳霉糖泰乐菌素，水解物出峰在前，母体出峰在后。有可能您的标品中本身就含有代谢产物，建议用液质看看，判断一下。
您好我想问下这个文献支持吗？您可以说的再详细些吗？而且我水相PH在6.2左右。
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2022/5/31 13:13:38 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:泰乐菌素在酸性条件，特别是ph小于4下，容易水解生成脱碳霉糖泰乐菌素，水解物出峰在前，母体出峰在后。有可能您的标品中本身就含有代谢产物，建议用液质看看，判断一下。
您好我想问下这个有文献支持吗？您说的可以再详细些吗？我的流动相PH6.2
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xiaolanzi5
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2022/5/31 13:59:11 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_d97bd62c(Ins_d97bd62c) 发表:您好我想问下这个有文献支持吗？您说的可以再详细些吗？我的流动相PH6.2
以前我们做过，当时查了些文献看的。我给您再找找看哈。
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xiaolanzi5
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2022/6/1 8:39:03 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:以前我们做过，当时查了些文献看的。我给您再找找看哈。
我找到了这篇文献，您看看有没有参考性。
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2022/6/1 14:27:37 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:我找到了这篇文献，您看看有没有参考性。
您好我想再问下那个我这个PH6.2条件下泰乐菌素会分解吗？还有可以请教一下您当时做的这个泰乐菌素液相条件是什么吗？
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2022/6/1 14:54:07 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_d97bd62c(Ins_d97bd62c) 发表:
您好我想再问下那个我这个PH6.2条件下泰乐菌素会分解吗？还有可以请教一下您当时做的这个泰乐菌素液相条件是什么吗？
您参考一下这篇文章吧，时间久了，具体的液相条件记不清了。
附件：
泰乐菌素.pdf
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