主题：【已应助】液相色谱柱选择条件？

一般是先根据物质性质选择柱子

　一、液相色谱柱选择方法|液相色谱柱选择的简单思路

　　1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的操纵本钱等等。

　　 2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。

　　 3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。

　　二、液相色谱柱选择方法|液相色谱柱选择的条件

　　填料基质

　　1.硅胶基质：纯度高本钱低，强度大，化学修饰轻易，但pH值范围有限。大多硅胶基质填料在pH2-8之间稳定，但经过特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。

　　2.聚合物基质：应用pH值范围宽，温度稳定(高温可以达到80度以上)，机械强度小。

　　颗粒外形

　　大多现代HPLC填料都是球形颗粒，但有时是不规则的颗粒。球形颗粒提供较低的柱压、较高的柱效和稳定性以及较长的柱寿命在使用高粘度的活动相时；不规则颗粒有较大比表面积和相对低廉的价格。

　　颗粒粒径

　　粒径越小柱效越高、分离度越高，但同时会导致较高柱压降。选择1.5-3μm的填料以解决一些复杂样品,UPLC可以使用1.5μm的填料；另外10μm或更大粒径的填料用作半制备或制备柱。

　　含碳量

　　含碳量指的是硅胶表面键合相的比例，与比表面积和键合覆盖度等有关。高含碳量进步柱容量、分辨率及分析时间，用于要求高分离度的复杂样品；低含碳量分析时间短、展现不同的选择性，用于快速分析简单样品及需要高含水活动相条件的样品。一般C18的含碳量在7-19%不等。

　　孔径和比表面积

　　HPLC吸附介质是多孔的颗粒，尽大多数的反应表面于孔内。因此，分子必须进进孔内才能被吸附和分离。

　　孔径和比表面积是相辅相成的两个概念。孔径小比表面积大，反之亦然。比表面积大，增加样品与键合相之间的反应，增加保存,上样量和复杂成分的分离度；比表面积小，平衡时间快，适合梯度分析。

　　孔容和机械强度

　　孔容，又称“孔体积”。指单位颗粒的空隙体积大小。它能很好的反应填料的机械强度。孔体积大的填料相对孔体积小的填料机械强度要略弱。孔体积为1.5mL/g或更小的填料大多用于HPLC分离，而孔体积大于1.5mL/g的填料使用于尺寸排阻色谱和低压色谱。

　　封端封端

　　封端能够降低极性碱性化合物由于与裸露的硅醇基相互作用而产生的拖尾峰。不封端键合相相对封端键合相会产生不同的选择性，尤其是极性样品。

了解样品和杂质，它们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等，液相色谱柱决定终分离效果，所以在选择色谱柱时候有必要考虑清楚。
1.样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱

　　2. 如果样品极性太强，或酸性太强;可以选择CN，NH2，或硅胶柱，HILIC(亲水色谱)，也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱(缺点是离子对试剂平衡时间长，对流动相pH要求比较精密，否 则很难重复实验，另外离子对试剂很难洗下来，基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它实验)

　　3. 若样品是碱性的;可选择高纯硅胶柱(高纯硅胶缺少金属杂质，且硅胶端基封尾)或一些经过修饰的C18柱(如极性嵌入技术或碱去活技术等)，他们都会减少碱性化合物的拖尾，一般会选择中性或偏碱的条件下做，因为这样可增加碱性样品的保留

　　4.如果碱性化合物的极性太强，或碱性太强;可以选择宽pH的C18色谱柱在高pH值检测(优点是方法开发简单，缺点是目前实 现这一技术的色谱柱品牌比较少，价格也高)或者选用HILIC色谱柱(硅胶柱在反相条件下使用，这也是很经典的检测碱性样品的方法)选择强离子交换柱(缺点 是不能用来分析其它样品，对流动相pH要求比较精密，否则很难重复实验)也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱

楼主，液相色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。
液谱相色柱选择方法和液相色谱柱选择的简单思路如下：
1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的操纵本钱等等。
2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。
3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。
  液相色谱柱由检测器、高压液体泵及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键;同时也是液相色谱工作者获得正确且可靠的实验数据的必经之路。
  液相色谱柱在使用前，进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行（出厂测试所使用的条件是正常条件），只有这样，测得的结果才有可比性。液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。色谱柱在使用一段时间后,常遇到柱子受污染,柱效下降的问题,采用适当的方法对色谱加以保护和再生,能够延长色谱柱的使用寿命。

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一般依据检测的标准

如果有参考文献，在色谱柱选择方面是可以提高效率的。

最终选用何种色谱柱，取决于样品本身的化学性质。

与元素或者检测器无关。

例如待测物质为常规的弱极性有机物，如果可以溶解于水-甲醇（乙腈）体系，那么ODS色谱柱是可以考虑使用的。

如果待测物质极性较强，在水溶液中容易解离，那么可以考虑使用离子交换柱。

如果待测物质含有特定基团（例如苯基），那么苯基柱可能是更好的选择。