主题:【已应助】正相色谱流动相调节

浏览0 回复10 电梯直达
箫琼
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哪位老师对正相比较了解的能不能指点一下

比如我参考文献选择的一个方法,流动相是庚烷:正戊醇=2000:2.5,感觉好多方法都是这么大量的正相溶剂里加那么一点点的极性稍强的溶剂有什么用啊,如果我现在有色谱峰分不开的,相比于反相色谱不是越分不开应该越增大水的比例,我觉得应该是减少这个醇的比例吧。
推荐答案:wuyuzegang回复于2022/09/08
正相色谱选择原则与反相色谱相仿,正己烷相当于是在反相色谱中的水相,而乙醇、四氢呋喃或氯仿等相当然于反相色谱中的乙腈或甲醇,三氟乙酸和三乙胺也是用来调节PH值的,但有一个问题要注意,一般 正相色谱不用缓冲盐,因为正相色谱一般只用有机溶剂,不用水相,所以与缓冲盐不溶解。而通常正乙烷的量都是超过50%的。根据样品的结构,酸式样品加酸调节流动相,碱式样品加碱调整流动相。
正相色谱流动相不能做梯度,因为基线漂移太大。还有正相色谱中很大的一个应用是进行手性检测,手性检测根据柱子的要求对于是流动相的要求也非常高。
总之,正相色谱的使用在液相色谱中使用相对来说没有反相色谱使用广泛,使用之前一定多看色谱柱的使用说明书。
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wuyuzegang
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正相色谱选择原则与反相色谱相仿,正己烷相当于是在反相色谱中的水相,而乙醇、四氢呋喃或氯仿等相当然于反相色谱中的乙腈或甲醇,三氟乙酸和三乙胺也是用来调节PH值的,但有一个问题要注意,一般 正相色谱不用缓冲盐,因为正相色谱一般只用有机溶剂,不用水相,所以与缓冲盐不溶解。而通常正乙烷的量都是超过50%的。根据样品的结构,酸式样品加酸调节流动相,碱式样品加碱调整流动相。
正相色谱流动相不能做梯度,因为基线漂移太大。还有正相色谱中很大的一个应用是进行手性检测,手性检测根据柱子的要求对于是流动相的要求也非常高。
总之,正相色谱的使用在液相色谱中使用相对来说没有反相色谱使用广泛,使用之前一定多看色谱柱的使用说明书。
hujiangtao
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检测老菜鸟
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比如我参考文献选择的一个方法,流动相是庚烷:正戊醇=2000:2.5,感觉好多方法都是这么大量的正相溶剂里加那么一点点的极性稍强的溶剂有什么用啊,如果我现在有色谱峰分不开的,相比于反相色谱不是越分不开应该越增大水的比例,我觉得应该是减少这个醇的比例吧。

把庚烷比作正己烷,把戊醇比作丙醇就是正相常见的流动相了。
安平
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一般情况下,硅胶正相分析时,流动相中的极性相比例越高,保留越弱。


稍微提高醇类比例,保留会明显减弱。



hnteng
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增加醇量保留时间缩短,增加烷量保留时间变长。
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2022/9/8 19:38:23 Last edit by hnteng
分离纯化小兵
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xiaolanzi5
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减少醇的比例增加了目标物的保留。同样道理,醇换成极性弱一点的溶剂也会增加保留。
dadgoh
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原文由 hnteng(hnteng) 发表:增加醇量保留时间缩短,增加烷量保留时间变长。
这个表述简单明了,记住即可。
zzy19810115
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xx_dxd_xx
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正相的保留顺序跟反相是相反的,这也是正相、反相名字的由来。对于正相色谱,烷多就是极性弱,保留增强;醇多就是极性强,保留减弱。多数情况是保留增强有利于分离。不过正相色谱有些问题比较复杂,不像反相那么好做。首先是要注意流动相必须是无水的,有时候吸收空气中微量水分就会影响分离。你的条件里面醇的比例这么低,也是容易受微量水影响的。再一个就是醇的比例太低,不建议用泵在线混合,最好提前配好再上机用。手工配置的时候也要注意,少的那一项要足够准确,最好用移液管或者移液枪加。
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