主题：【求助】有关up-conversion fluorescence spectra用F4500如何实验？？

：开 机


1. 将 Power 键按至 〝 On 〞 的位置，热机十分钟。
2. 按下 Xe Lamp 的 〝 Start 〞 钮，启动 Xe Lamp ，三秒内如果 Xe Lamp 指示灯没亮，则放开该按钮，十秒后再重新按下 Xe Lamp 的 〝 Start 〞 钮，启动 Xe Lamp ，直到 Xe Lamp 指示灯亮起。
3. 按下主开关 Main 钮至 〝 On 〞 的位置。
4. 按下计算机的电源开关﹝ 在主机的右下角 ﹞。
5. 在桌面点选FL menu，并启动initialize和计算机联机，计算机自动和仪器联机。
6. 联机成功后，出现功能选单 Menu Select。
B：激发及放射之最大波长扫描 (Slit：5 nm / 5 nm)
1. 在功能选单 Menu Select 中，选择 Wavelength Scan 后，以鼠标按下 〝Run〞后，出现 Ex Scan 的窗口。
2. 拉下 Parameter 之功能选单，选择 Scan parameters ﹝ 或按下 F2 键 ﹞以进入 Scan  parameters 的窗口。
3. 在 Scan Mode 选 Excitation
在 Data Mode 选 Fluorescence
在 Scan Speed 选 1200 nm / min
在 EX Start WL 输入 300 nm
在 EX End WL 输入 600 nm
在 Ordinate Maximum输入3000
在 Ordinate Minimum输入 0000
在 EM Start WL 输入 450 nm
以鼠标按下〝OK〞键。
4. 拉下 Scan 之功能选单，选择 Start Scan ﹝ 或按下 F5 键 ﹞，开始扫描。
5. 扫描结束后，拉下 Data Processing之功能选单，选择 Peak 后，再选择  Peak / Valley Cursor 后，按下〝RUN〞键。
6. 按下鼠标移动 Cursor 到最大之吸收峰处，计录屏幕右上角之 EX 波长值为激发之最大波长﹝例如350 nm﹞。
7. 拉下 Data Processing之功能选单，选择 Peak 后，以结束数据分析。
8. 拉下 Data Processing之功能选单，选择 Peak 后再选择Print peaks，按下〝RUN〞键，即可印出扫描光谱图出来。
9. 拉下 Parameter 之功能选单，选择 Scan parameter ﹝ 或按下 F2 键 ﹞以进入 Scan  parameter 的窗口。
10. 在 Scan Mode 改选 Emission
在 Data Mode 选 Fluorescence
在 Scan Speed 选 1200 nm / min
在 EM Start WL 输入 300 nm
在 EM End WL 输入 600 nm
在 Ordinate Maximum输入3000
在 Ordinate Minimum输入 0000
在 EX WL 输入先前计录之激发最大波长，﹝例如350 nm﹞。
以鼠标按下〝OK〞键。
11. 拉下 Scan 之功能选单，选择 Start Scan ﹝ 或按下 F5 键 ﹞，开始扫描。
12. 扫描结束后，拉下 Data Processing之功能选单，选择 Peak 后，再选择  Peak / Valley Cursor 后，按下〝RUN〞键。
13. 按下鼠标移动 Cursor 到最大之吸收峰处，计录屏幕右上角之 EM 波长 值为放射之最大波长﹝例如450 nm﹞。
14. 拉下 Data Processing之功能选单，选择 Peak 后，以结束数据分析。
15. 拉下 Data Processing之功能选单，选择 Peak 后再选择Print peaks，按下〝RUN〞键，即可印出扫描光谱图出来。
16. 按下窗口左上角之方形控制钮，拉下功能选单，选择 Menu Select 回到主选单。
C：荧光测定 (Slit：5 nm / 5 nm)
1、 在Menu Select 回到主选单。
2、 选择 Photometry 并按下 RUN。
3、 拉下 Parameter 之功能选单，选择 Scan parameters ﹝ 或按下 F2 键 ﹞以进入 Scan  parameter 的窗口。
4、 在 Wavelength (EX) WL 输入激发之最大波长﹝例如350 nm﹞。
在 Wavelength (EM) WL 输入放射之最大波长﹝例如450 nm﹞。
在 Maximum输入5000
在 Minimum输入 0000
以鼠标按下〝OK〞键。
5、 拉下 Scan 之功能选单，选择 Scan。
6、 放入 Blank ( 0.05 M H2SO4) 后，按下 〝Blank〞 测量Blank值，三次。
7、 取出blank，放入Standard 后，按下 Scan测量( 每个样品测三次，取平均值。)
8、 测完一个 Standard 后，依序放入其它Standard，重复步骤7直到最后一个 Standard 及Sample后，计录所有Standard及Sample的荧光值后，按下〝END〞键以结束实验。
D：关 机
1、 关闭 Photometry 窗口到 Menu Select 窗口。
2、 关闭Menu Select 窗口。
3、 关闭 Program Manager。
4、 关闭计算机。
5、 关闭 Main 键。
6、 关闭 Power。开机顺序：

（1）开机前首先确认主机两个开关：POWER/MAIN均处于关闭状态（搬向O处）。先接（2）通电源开关（POWER），5秒钟后再按下氙灯点灯按钮，当氙灯点燃后
（3）再接通主开关（MAIN）。此时主开关上方绿色指示灯连续闪动三下。, v＊ L;
（4）接通电脑及打印机电源，Win98开始建立，随后F-4500操作界面自动进入。
（5）按界面提示选择操作方式。

原文由 crystalcff(crystalcff) 发表:
Downconversion luminescence spectra were recorded with a Hitachi F-4500 fluorescence spectrophotometer.
Upconversion fluorescence spectra were obtained on the Hitachi F-4500 fluorescence spectrophotometer with a 0-800 mW adjustable laser (980 nm, Beijing Hi-Tech Optoelectronic Co.,China) as the excitation source, instead of the xenon source in the spectrophotometer, and with a fiber optic accessory.
upconversion fluorescence spectra 的测试方法是否同普通的荧光光谱测试方法相同！所谓光源使用的可调激光具体怎么操作
望有过这方面操作经验的达人现身说法！

软件设置采用 发光模式；关掉氙灯或在入射口用黑色板挡住；

样品放置需要采用特殊的夹具，光路是从发射侧顺时针90°-----激光器入射；

激光器最好采用光纤口，易于固定。

样品面和入射光不要采用45°，避免激光对检测器的伤害；

狭缝从小到大调整；

最好有校正光谱选择