前言：

苯并芘又称苯并[α]芘，英文缩写BaP，是一种常见的高活性间接致癌物和突变原。苯并[α]芘释放到大气中以后，总是和大气中各种类型微粒所形成的气溶胶结合在一起，在8微米以下的可吸入尘粒中，吸入肺部的比率较高，经呼吸道吸入肺部，进入肺泡甚至血液，导致肺癌和心血管疾病。

加压流体萃取技术是近年来发展起来的一种在高温、高压条件下快速处理固体或半固体样品的方法，与常用的索氏提取、超声提取、微波萃取技术等方法相比，具有节省溶剂、快速、回收率高、健康环保、自动化程度高等明显优势。

本实验参考方法HJ 956-2018，使用全自动高效快速溶剂萃取系统提取吸附膜中的苯并[α]芘，全自动固相萃取系统净化，平行浓缩系统浓缩后用高效液相色谱仪进行检测的一整套方法。实验方法简便、回收率较高且平行性良好，适用于环境空气中苯并[α]芘的检测。

关键词：环境空气，苯并[α]芘，HJ 956-2018

实验部分

1仪器与试剂

1.1 Flex-HPSE全自动高效快速溶剂萃取系统；

1.2 SPE1000全自动固相萃取系统；

1.3 M64高通量平行浓缩系统；

1.4 LC600高效液相色谱仪，配有荧光检测器；

1.5 苯并[α]芘标准储备液（1000μg / mL，溶剂为乙腈）；

1.6 苯并[α]芘标准中间液（30μg / mL，溶剂为乙腈）；

1.7 苯并[α]芘标准使用液（3μg / mL，溶剂为乙腈）；

1.8 二氯甲烷（色谱纯）；

1.9 正己烷（色谱纯）；

1.10 乙腈（色谱纯）；

1.11 二氯己烷-正己烷混合溶液：3+7；

1.12 硅胶固相萃取柱（1g/6mL，LabTech）；

1.13 超细石英纤维滤膜

2环境空气样品处理

2.1 提取

将采样后的滤膜放入快速溶剂萃取罐中，设定萃取温度100℃，压力1500psi（10.34Mpa），静态萃取5min，萃取溶剂为二氯甲烷（1.8），淋洗体积为60%池体积，氮气吹扫60s，循环次数2次，萃取液收集在60mL收集瓶内，具体方法如图1所示。

图1 加速溶剂萃取方法

2.2 浓缩

将收集管直接置于M64中，浓缩温度40℃，开启氮吹针定时跟随功能。浓缩过程中使用正己烷淋洗收集管，最后置换溶剂为正己烷，样品体积在1mL左右。

2.3 净化

净化过程采用硅胶固相萃取柱净化，具体方法如下：

按照图2方法进行净化实验，其中洗脱溶剂为二氯己烷-正己烷混合溶液（1.11），收集液用M64浓缩至近干，用乙腈定容至1mL，待测。

图2 硅胶固相萃取柱净化方法

2.4 空白加标处理

按2.1方法装填空白滤膜过程中，加0.1mL标准使用液（1.7）至萃取罐中，然后按照2.1~2.3方法进行实验，最后用乙腈定容至1mL，以此来测定空白加标回收率。

2.5 仪器参考条件

色谱柱：C18 4.6mm*250mm；柱箱温度：30℃；柱流速：1.0mL/min；进样量：20μL；荧光检测器的激发波长/发射波长：305nm/430nm；流动相：乙腈水（8+2）。

3、实验结果

3.1苯并[α]芘标准色谱图

图3 500ng/mL苯并[α]芘标准色谱图

3.2 空白加标色谱图

图4 300ng/mL空白加标色谱图

3.3 标准曲线的建立

分别移取适量苯并[α]芘标准使用液（1.7），用乙腈（1.10）稀释，制备标准系列，质量浓度分别为0.025μg / mL、0.050μg / mL、0.100μg / mL、0.500μg / mL、1.00μg / mL、2.00μg / mL。

将标准系列溶液依次注入高效液相色谱仪，按照仪器参考条件（2.5）检测，得到不同浓度的苯并[α]芘的色谱图。以浓度为横坐标，以其对应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线如下图5所示。

图5 苯并[α]芘标准曲线

3.4 空白加标回收率

表1空白加标回收率

名称

回收率（%）

平均值

（%）

RSD

(%)

苯并[α]芘

113.5

99.7

93.0

116.6

109.5

94.5

104.5

9.6

4、结论

由表1可知，高效溶剂萃取-固相萃取-高效液相色谱法测定环境空气中的苯并[α]芘，加标回收率为93.0%~116.6%，RSD为9.6%。本方法测定的加标量为0.3μg，样品无检出。

60mL收集管同时适用于这三种仪器，实验过程中不需要进行液体的转移，能够有效的减少转移过程中造成的损失。