主题：【已应助】GC-MS前处理

浏览0 回复3 电梯直达

Ins_e020ef66

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

发表于：2023/05/11 16:44:08 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

每个样品30 mg转移到1.5 mL Eppendorf试管中，向每个样品中加入两个直径为4mm的钢球、20μL内标物（2-氯-1-苯丙氨酸溶于甲醇，浓度为0.3mg/mL）和600μL提取溶剂甲醇：水（4:1，v/v）。样品在?80℃下储存2min，并在60 Hz下超声处理2min。向每个样品中加入120μL氯仿，并剧烈涡旋样品，然后在环境温度下超声辅助提取10min，并在4℃下储存10min。样品在4℃下以13310 g离心10min。将500μL上清液的等分试样转移到玻璃取样小瓶中，在室温下进行真空干燥。随后加入80μL甲氧基胺盐酸盐（溶于吡啶中，浓度为15mg/mL）。将所得混合物剧烈涡旋2min，并在37°C下孵育90分钟。向混合物中加入80μL N，O-双三氟乙酰胺BSTFA（含1%三甲基氯硅烷（TMCS））和20μL正己烷，剧烈涡旋2min，然后在70℃下衍生60min。在GC–MS分析之前，将样品在环境温度下放置30min。

以上是我在文献上查到的一个用海参作GC-MS的前处理方法，有以下几个疑问，还请各位大佬解惑

1、“向每个样品中加入120μL氯仿”中120μL氯仿的作用是什么呢？
2、“随后加入80μL甲氧基胺盐酸盐（溶于吡啶中，浓度为15mg/mL）。”这里加入是将前面所得干燥样品复溶吗，这个溶液的作用是什么？
3、“向混合物中加入80μL N，O-双三氟乙酰胺BSTFA（含1%三甲基氯硅烷（TMCS））和20μL正己烷”这里80μL N，O-双三氟乙酰胺BSTFA、1%三甲基氯硅烷（TMCS）和20μL正己烷分别有什么作用

推荐答案：xiaoheihei回复于2023/05/12

1、“向每个样品中加入120μL氯仿”中120μL氯仿的作用是什么呢？
加入有机萃取剂，提取有机组分到有机相。
2、“随后加入80μL甲氧基胺盐酸盐（溶于吡啶中，浓度为15mg/mL）。”这里加入是将前面所得干燥样品复溶吗，这个溶液的作用是什么？
应该是复溶，甲氧基胺盐酸盐是甲氧胺基化试剂，估计是衍生化作用。
3、“向混合物中加入80μL N，O-双三氟乙酰胺BSTFA（含1%三甲基氯硅烷（TMCS））和20μL正己烷”这里80μL N，O-双三氟乙酰胺BSTFA、1%三甲基氯硅烷（TMCS）和20μL正己烷分别有什么作用
N，O-双三氟乙酰胺BSTFA衍生化试剂，降低羟基化合物的极性，增加其挥发性。正己烷是溶剂。

2
赞贴
3
回帖
0
收藏
0
拍砖
版主
招募

为您推荐

近期热榜

热门活动

专属顾问快速对接

获取验证码

立即提交

相关阅读

xiaoheihei

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2023/5/12 13:09:02 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

赞贴

拍砖

Ins_e020ef66

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2023/5/12 13:45:07 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xiaoheihei(xiaoheihei) 发表:
1、“向每个样品中加入120μL氯仿”中120μL氯仿的作用是什么呢？
加入有机萃取剂，提取有机组分到有机相。
2、“随后加入80μL甲氧基胺盐酸盐（溶于吡啶中，浓度为15mg/mL）。”这里加入是将前面所得干燥样品复溶吗，这个溶液的作用是什么？
应该是复溶，甲氧基胺盐酸盐是甲氧胺基化试剂，估计是衍生化作用。
3、“向混合物中加入80μL N，O-双三氟乙酰胺BSTFA（含1%三甲基氯硅烷（TMCS））和20μL正己烷”这里80μL N，O-双三氟乙酰胺BSTFA、1%三甲基氯硅烷（TMCS）和20μL正己烷分别有什么作用
N，O-双三氟乙酰胺BSTFA衍生化试剂，降低羟基化合物的极性，增加其挥发性。正己烷是溶剂。

感谢解惑

赞贴

拍砖