原文由 tanxulin 发表:
本人菜鸟一只,近日进行硫酸软骨素标准实验,发现以水:乙腈=70:30清洗柱子时,0.8ml/min流速压力为80多bar,可改成流动相,乙腈:戊烷磺酸钠(10m mol/L)=10:90,大概进两个样品,10min后,压力骤降为10多bar。咱们亲爱的国标要求柱子条件为:C18(用极性小分子封尾),粒径5um,柱长250mm,内径4.6mm,我用的柱子是安捷伦滴ZORBAXA SB-C18柱,其它条件都一样。
发现上述情况之后,俺仔细检查了一下通路,未漏!而且把流动相换成水和乙腈之后,压力又肺腑鸟!是不是用的柱子不合适,塌陷了?吓的我不敢进样了。对了对了,还有一个情况是两次进样的保留时间好像漂了!咋回事啊! 菜鸟难做啊
原文由 tanxulin 发表:
本人菜鸟一只,近日进行硫酸软骨素标准实验,发现以水:乙腈=70:30清洗柱子时,0.8ml/min流速压力为80多bar,可改成流动相,乙腈:戊烷磺酸钠(10m mol/L)=10:90,大概进两个样品,10min后,压力骤降为10多bar。咱们亲爱的国标要求柱子条件为:C18(用极性小分子封尾),粒径5um,柱长250mm,内径4.6mm,我用的柱子是安捷伦滴ZORBAXA SB-C18柱,其它条件都一样。
发现上述情况之后,俺仔细检查了一下通路,未漏!而且把流动相换成水和乙腈之后,压力又肺腑鸟!是不是用的柱子不合适,塌陷了?吓的我不敢进样了。对了对了,还有一个情况是两次进样的保留时间好像漂了!咋回事啊! 菜鸟难做啊
原文由 tanxulin 发表:
本人菜鸟一只,近日进行硫酸软骨素标准实验,发现以水:乙腈=70:30清洗柱子时,0.8ml/min流速压力为80多bar,可改成流动相,乙腈:戊烷磺酸钠(10m mol/L)=10:90,大概进两个样品,10min后,压力骤降为10多bar。咱们亲爱的国标要求柱子条件为:C18(用极性小分子封尾),粒径5um,柱长250mm,内径4.6mm,我用的柱子是安捷伦滴ZORBAXA SB-C18柱,其它条件都一样。
发现上述情况之后,俺仔细检查了一下通路,未漏!而且把流动相换成水和乙腈之后,压力又肺腑鸟!是不是用的柱子不合适,塌陷了?吓的我不敢进样了。对了对了,还有一个情况是两次进样的保留时间好像漂了!咋回事啊! 菜鸟难做啊
原文由 corn5672 发表:原文由 tanxulin 发表:
本人菜鸟一只,近日进行硫酸软骨素标准实验,发现以水:乙腈=70:30清洗柱子时,0.8ml/min流速压力为80多bar,可改成流动相,乙腈:戊烷磺酸钠(10m mol/L)=10:90,大概进两个样品,10min后,压力骤降为10多bar。咱们亲爱的国标要求柱子条件为:C18(用极性小分子封尾),粒径5um,柱长250mm,内径4.6mm,我用的柱子是安捷伦滴ZORBAXA SB-C18柱,其它条件都一样。
发现上述情况之后,俺仔细检查了一下通路,未漏!而且把流动相换成水和乙腈之后,压力又肺腑鸟!是不是用的柱子不合适,塌陷了?吓的我不敢进样了。对了对了,还有一个情况是两次进样的保留时间好像漂了!咋回事啊! 菜鸟难做啊
戊烷磺酸钠,你做的是离子对试剂,平衡时间需要长一些!!!!
为了提高重现性,建议最好使用一根柱子固定做离子对试剂!!!!
不要切换了,保留时间漂就是离子对试剂引起得,离子对试剂冲洗时间需要很长.(半天以上,还不一定冲洗得干净)