主题：【分享】磷脂色谱样品制备

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小小矮马

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小矮马发表于：2023/09/01 00:32:28 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

磷脂色谱样品制备

DPPC、LysoPC、DOPC、DSPC和DMPC采用三氯甲烷-甲醇（1:1，v/v）进行配制，其余磷脂类标准品采用三氯甲烷-甲醇（3:1，v/v）进行配制。各类磷脂标准品溶液浓度控制在0.5-1.0 mg/mL，所有样品均用0.45 μm有机滤膜过滤，-20 °C冷藏备用。

磷虾油磷脂和大豆卵磷脂提取：将磷虾油磷脂胶囊或大豆卵磷脂胶囊分别剪开，称取胶囊内容物各100 mg，用20 mL正己烷-异丙醇（1:1，v/v）溶解稀释，样品超声5 min，用0.45 μm有机滤膜过滤，常温下放置备用。

人血清磷脂提取采用MTBE-MeOH体系，在200 μL人血清中加入400 μL MTBE和80 μL MeOH，涡旋30 s，以3000 rpm离心15 min，此时两相分离，界面出现白色沉淀，取上层有机相，用氮气将溶液吹干，用1 mL二氯甲烷-甲醇（1:1，v/v）复溶，用0.45 μm有机滤膜过滤后冷藏备用。

乳腺癌细胞（河北大学附属医院提供）磷脂提取采用氯仿-甲醇体系，向细胞沉淀中加入2 mL氯仿-甲醇-水（2:1:1，v/v/v），4 °C 8000 rpm离心10 min，吸取下层有机相，向剩余溶液中加入50 μL甲酸和l mL上述混合溶液，4°C 8000 rpm 离心10 min，吸取下层有机相，将两次下层有机相混合，用氮气吹干，加入2 mL氯仿-甲醇-水（2:1:1，v/v/v）2 mL复溶，用0.45 μm有机滤膜过滤后冷藏备用

附件：

15磷脂色谱样品制备.docx