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主题：【已应助】色谱峰分离度问题

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Ins_947866fd
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发表于：2023/10/04 16:12:23 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位色谱大佬好，我最近在做谷维素的分析。色谱条件：

NH2氨基柱，流动相：无水乙醇；

流速：0.8mL/min；

柱温：40℃；

检测器：紫外检测器，波长326nm；

进样量：10μL

测出来的样品（样品主要组成为脂肪酸、脂肪酸甲酯、甘油酯、谷维素、少量蜡、磷脂等）色谱图分离效果不好，谷维素标品色谱图可以。?
想请问一下，这是柱子柱效不好了吗（这根氨基柱放了好长时间了），如果是流动相的问题，该如何调节流动相呢？
附件：
LST6121.2-2017谷维素液相.doc(未验证)
推荐答案：hujiangtao回复于2023/10/07
应该是柱效降低了
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通标小菜鸟
v3141805
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2023/10/7 17:31:32 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、基线未归0，从-400左右开始出峰，图谱很难看。
2、谷维素标准品出峰不是还有很好，由于峰高比较高，纵坐标比例压缩，如果放大看谷维素色谱峰的峰谷，拖尾会更加明显。而且即使不放大，原图从积分红线就能看出，峰拖到18min那里去了。
3、样品出峰图，分离度很差，有些可以看出包在里面并没有分开，不好定性定量。
以上表现说明你柱子的柱效肯定不怎么好，建议更换色谱柱，然后再去想办法提高分离度，先把柱子选好，然后再进行优化。
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hujiangtao
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2023/10/7 20:09:33 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该是柱效降低了
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myoldid
v2963297
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2023/10/8 9:51:03 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先咨询一下厂家，你这氨基柱是正相还是HILIC，能不能进水？如果能进水的话，可以在流动相中加入10%的水，然后用流动相稀释标品和样品，同时降低标品的浓度。这柱子看起来还有希望的
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Insm_993bed98
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2023/11/20 14:54:16 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
检查理论塔板数，拖尾因子，与过往数据做对比，如果变差很多就是色谱柱处问题了。一般来说，但凡峰型有问题的时候，基本上是色谱柱出了问题
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