主题:【已应助】液相缓冲盐的问题

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Ins_7e83b33c
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各位大佬,最近在分一个中药制剂里面的峰,主要成分是生物碱,所以用乙腈:磷酸盐做流动相,但是在固定时间会跑出一些固定的杂峰,排除了样品和溶剂污染的原因,现在觉得是缓冲盐析出的问题(进了对照品同样出现杂峰),具体情况如下(红色圈起来的怀疑是析出的盐),上面的波长是215,下面的是289nm,各位觉得是什么原因以及怎么解决呢?
推荐答案:dadgoh回复于2023/10/29
如果是缓冲盐有杂质,溶剂空白亦应该有这些干扰峰。且保留时间不固定。
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xiaolanzi5
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如果是乙腈和磷酸盐混合析出的话,可以考虑甲醇和磷酸盐做流动相试试。
dadgoh
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如果是缓冲盐有杂质,溶剂空白亦应该有这些干扰峰。且保留时间不固定。
myoldid
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磷酸盐的最大吸收波长在210纳米左右,但是你绿色谱图在215nm下相比285下干净一些,所以就不是磷酸盐析出。那些杂峰就该是样品中引入的,可以尝试改变缓冲盐的pH。如果是酸性分析物,应选择低 pH 缓冲液流动相,以防止分析物离子化,获得更好保留。如果是碱性化合物,虽然在高pH 条件下才能得到其非离子化形态,但这对色谱柱不利(超出色谱柱耐受范围)。其实许多碱性化合物在低 pH 条件下的保留就已经足够了。
Ins_7e83b33c
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原文由 myoldid(v2963297) 发表:
磷酸盐的最大吸收波长在210纳米左右,但是你绿色谱图在215nm下相比285下干净一些,所以就不是磷酸盐析出。那些杂峰就该是样品中引入的,可以尝试改变缓冲盐的pH。如果是酸性分析物,应选择低 pH 缓冲液流动相,以防止分析物离子化,获得更好保留。如果是碱性化合物,虽然在高pH 条件下才能得到其非离子化形态,但这对色谱柱不利(超出色谱柱耐受范围)。其实许多碱性化合物在低 pH 条件下的保留就已经足够了。
你好,我说错了,下面才是215,上面才是289
Ins_7e83b33c
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原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:
如果是乙腈和磷酸盐混合析出的话,可以考虑甲醇和磷酸盐做流动相试试。
好的,,我试试
有水有渝
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采用的方法是标准方法还是自建方法,缓和盐的浓度是多少,楼主是等度洗脱还是梯度洗脱?215nm下杂峰比289下多也是正常的,进个空白溶剂针看看是不是溶液导致的,如果空白正常,那就说明是样品本身带有的。
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