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凝胶色谱（GPC）
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主题：【已应助】GPC分子量结果

浏览0 回复13 电梯直达
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发表于：2023/11/02 14:45:54 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
同一种物质，相同的测试条件，不同设备测出来分子量存在数量级的差异，测试平台给的说法是——不同设备之间不具有复现性，该以哪个为准呢，有专业大佬能给解惑一下嘛

设备1  Calibration Curve: y = 12.663704 - 0.995668x^1
          Mp              Mn            Mw              Mz                Mz+1              Mv              PD
          213279      134779      225948      328210          433334            211981      1.67643
设备2  Calibration Curve: y = 517.300327 - 162.784284x^1 + 20.804764x^2 - 1.329980x^3 + 0.042390x^4 -0.000539x^5
          Mp              Mn            Mw              Mz                Mz+1              Mv              PD
          34808        16899        42396          84182            136096            37582        2.50879
推荐答案：小不董回复于2023/11/07
从两个图来看，第一个是用的一根色谱分析的，分离得也可以，也在标准曲线范围内。
第二个图是用的两个色谱柱分析的，检测信号更强，进样浓度可能也更高，可以适当降低浓度测试，也在标准曲线范围内。
现在就有个问题，使用标准样品是否一致，都是一样的标准品吗？流动相体系是否一致。有没输入一样k和a值？
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小不董
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2023/11/3 13:21:18 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
两个用的标准曲线不一样，测得数据肯定不一样。有色谱图吗？样品出峰有没在标准样品和色谱柱检测范围内？
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2023/11/3 17:35:13 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小不董(doxw0323) 发表:
两个用的标准曲线不一样，测得数据肯定不一样。有色谱图吗？样品出峰有没在标准样品和色谱柱检测范围内？
倒是都在范围内
附件：
色谱图.pdf
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小不董
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2023/11/6 8:45:57 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_7bd56a27(Ins_7bd56a27) 发表:
倒是都在范围内
色谱图，代开出错，文件是不是有问题？
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2023/11/6 13:19:10 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
文由 小不董(doxw0323) 发表:
两个用的标准曲线不一样，测得数据肯定不一样。有色谱图吗？样品出峰有没在标准样品和色谱柱检测范围内？
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小不董
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2023/11/7 15:05:14 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
从两个图来看，第一个是用的一根色谱分析的，分离得也可以，也在标准曲线范围内。
第二个图是用的两个色谱柱分析的，检测信号更强，进样浓度可能也更高，可以适当降低浓度测试，也在标准曲线范围内。
现在就有个问题，使用标准样品是否一致，都是一样的标准品吗？流动相体系是否一致。有没输入一样k和a值？
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2023/11/9 11:20:44 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小不董(doxw0323) 发表:
从两个图来看，第一个是用的一根色谱分析的，分离得也可以，也在标准曲线范围内。
第二个图是用的两个色谱柱分析的，检测信号更强，进样浓度可能也更高，可以适当降低浓度测试，也在标准曲线范围内。
现在就有个问题，使用标准样品是否一致，都是一样的标准品吗？流动相体系是否一致。有没输入一样k和a值？
图1  PL-GPC120 进样浓度0.10 mg/ml Injection Volume: 100.0 ul   标品：PS  流动相体系：DMF 80℃  K of Sample: 14.1000    Alpha of Sample: 0.7000
色谱柱PLgel 10um MIXED-B 300×7.5mm
图2  PL-GPC220 进样浓度1.00 mg/ml Injection Volume: 20.0 ul   标品：PS  流动相体系：DMF 80℃  K of Sample: 14.1000    Alpha of Sample: 0.7000
色谱柱PLgel 10um MIXED-B 300×7.5mm
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小不董
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2023/11/9 16:29:18 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
和我猜测的一样，图2的浓度是图1浓度的十倍，浓度太高了，分子量不准了，得稀释。

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2023/11/9 16:53:21 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小不董(doxw0323) 发表:
和我猜测的一样，图2的浓度是图1浓度的十倍，浓度太高了，分子量不准了，得稀释。

这样的话，是图2的检测结果不准确 是吗
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小不董
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2023/11/10 23:53:20 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你可以这么怀疑，还要看看用的标准物质的分子量，输入的k和a值是否一致
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2023/11/13 15:57:31 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小不董(doxw0323) 发表:
你可以这么怀疑，还要看看用的标准物质的分子量，输入的k和a值是否一致
这个相对分子量结果还真是不好对比啊  谢谢大佬耐心解惑哇
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