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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】新的色谱柱走对照品每一针都不一样

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发表于：2023/11/11 22:58:24 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
方法是流动相A甲醇加乙酸胺，流动相B是水加乙酸胺，浓度都很小很小，每升0.385g，初始比例44:56，新柱子甲醇低流速走了一个晚上，第二天就直接上流动相了，然后走的每一针都不一样，基线也很难看，色谱柱是不是被我冲坏了呀??
推荐答案：dadgoh回复于2023/11/13
冲柱子过夜尽量用单一流动相，小流量。实验前用流动相平衡一段时间，等待基线平稳。若不平按一楼说的仔细找原因。
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2023/11/12 21:03:08 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主你加的是乙酸胺还是乙酸铵？一般液相用乙酸铵比较常见。其次，楼主用的什么色谱柱，把色谱柱型号报上来。一般购买的色谱柱按照楼主所说的流动相即使低流速走一晚上也是不会直接损坏柱子的。而且按照楼主所说走出来的基线不好，每一针也不一样，那我怀疑楼下的液相系统不稳定，比如管路有气泡，或者流通池有气泡。建议楼主先不要急着走样，把使用的流动相都超声脱气一遍，放上仪器后，然后打开液相purge阀，充分排出管路及系统里面可能存在的气泡。然后拧上purge阀，开启正常流速平衡二十分钟，观察泵的压力线变化幅度，等压力线平稳后再走样尝试。还有楼主信号采集的波长是多少？如果设置低波长会受流动相影响基线波动大
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sdlzkw007
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2023/11/13 6:26:35 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
问题貌似没有说清楚啊。柱子的型号规格？等度还是梯度洗脱？系统的平衡基线怎么样？建议你使用流动相之前用同比例的纯水替代盐溶液，结束后也要同样操作。
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dadgoh
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2023/11/13 8:55:16 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
冲柱子过夜尽量用单一流动相，小流量。实验前用流动相平衡一段时间，等待基线平稳。若不平按一楼说的仔细找原因。
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xiaolanzi5
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2023/11/13 18:43:36 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
您用的不是c18柱吧？
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安平
byron1111
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2023/11/14 10:03:07 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主上传谱图，具体是谱图那部分不正常？
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