主题：【求助】SEC-MALLS测定多糖分子量求助

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Ins_61641e12

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发表于：2023/11/22 22:04:07 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

本人最近在做多糖的SEC-MALLS测定分子量，用的流动相是0.1M氯化钠＋0.02%的叠氮化钠，流速是0.5ml/min,上样浓度是1mg/mL,上样体积200ul，时间是40min，跑出来的如图所示，出现了LS信号和DRI信号偏移很大的情况。想请问一下是什么原因造成这种偏移的情况的呢？
另外，在拟合数据的时候选择峰的时候应该是以LS信号为选择标准，还是以DRI信号为标准呢？有很多不明白的地方，还请大佬指教！谢谢！

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小不董

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2023/11/27 9:40:08 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

LS的信号和分子量大小直接成正比，一般LS检测器在RI检测器之前，会发现LS的信号出峰在RI（UV）之前，在大分子部分，LS的信号会比RI的信号强，lS信号不仅仅和浓度相关，还和分子大小更相关，而RI和物质dn/dc值成正比，和浓度正相关。
像楼主这样的样品是不适合计算绝对分子量的，但是能很好发现样品在不同分子量大小的一个整体情况。拟合计算相对分子量，不知道你是用的什么软件，一般都是UV或者RI的，但是你要用之前标准曲线用的保留时间是哪个对应计算的。用LS不大适合，保留时间会提前，计算出来会偏大。

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2024/1/25 17:25:36 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 小不董(doxw0323) 发表:LS的信号和分子量大小直接成正比，一般LS检测器在RI检测器之前，会发现LS的信号出峰在RI（UV）之前，在大分子部分，LS的信号会比RI的信号强，lS信号不仅仅和浓度相关，还和分子大小更相关，而RI和物质dn/dc值成正比，和浓度正相关。像楼主这样的样品是不适合计算绝对分子量的，但是能很好发现样品在不同分子量大小的一个整体情况。拟合计算相对分子量，不知道你是用的什么软件，一般都是UV或者RI的，但是你要用之前标准曲线用的保留时间是哪个对应计算的。用LS不大适合，保留时间会提前，计算出来会偏大。

你好，我重新做了sec-malls-rid，更换了样品。结果如下图所示。我现在有一个疑惑的点在于第二张图中显示的斜率为负值，这样如何判断他的构象呢？