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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：【已应助】紫外可见分光光度计测出的标准曲线斜率过大怎么回事？R2在三个九以上

浏览0 回复13 电梯直达
Ins_bc37ebf2
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发表于：2024/02/23 07:49:15 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
按照参考文献，配置0.1mg/ml对照品溶液。分别吸取0.5mL、0.75mL、1 mL、1.25mL、1.5mL对照品溶液，置于25mL容量瓶中，加入显色试剂2.5mL，摇匀，加入7%碳酸钠溶液6.25mL，蒸馏水定容，70°C水浴反应40min，采用紫外分光光度法，在波长760nm处测定吸光度值。以质量浓度为横坐标(X)，吸光度值为纵坐标(Y)绘制标准曲线，得到标准曲 线回归方程，斜率很大，做了四次实验，R2都在三个九以上，但是斜率基本都很大，怎么解决?
推荐答案：通标小菜鸟回复于2024/02/23
比色法出现斜率过大的原因：
1、浓度问题，校正点中被测因子的实际浓度高于曲线浓度。
2、吸光度问题，在显色反应中，某个干扰物与显色剂反应并产生干扰，使得吸光度变大。
3、考虑做实验用的试剂和器皿受到污染。
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通标小菜鸟
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2024/2/23 12:10:37 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
比色法出现斜率过大的原因：
1、浓度问题，校正点中被测因子的实际浓度高于曲线浓度。
2、吸光度问题，在显色反应中，某个干扰物与显色剂反应并产生干扰，使得吸光度变大。
3、考虑做实验用的试剂和器皿受到污染。
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等一个晴天
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2024/2/23 12:21:50 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
斜率大，截距也很大，核查一下试剂有没有污染或者是开瓶时间较长，贮存不当变质了
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ztyzb
zxz19900120
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2024/2/23 12:44:25 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、楼主没做零浓度点空白吗？考虑是纯水或者试剂的影响；2、建议自行配制标准品用有证标准标准溶液或者标准样品验证准确度，有可能是配制标准溶液本身的问题；3、考虑同步做仪器比对和人员比对查找原因。
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oscar_2007
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2024/2/24 18:38:07 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1. 加上空白零点，看看纯试剂有没有问题。
2.考虑试剂污染问题及干扰因素，建议重新配制，注意器皿的清洁。
3.做个人员比对看看结果是否一样分析原因。
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夕阳
anping
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2024/2/25 12:27:56 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
相关系数三个9太棒了！本底空白高可以采取扣除背景方式（但是需要使用双光束仪器）来解决。
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2024/2/25 12:29:22 Last edit by anping
m3316431
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2024/2/25 20:13:28 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
需要做零点空白，如果高的话，就在试剂纯度上找问题。
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Insp_ab748ec4
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2024/2/28 7:30:36 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 通标小菜鸟(v3141805) 发表:比色法出现斜率过大的原因：1、浓度问题，校正点中被测因子的实际浓度高于曲线浓度。2、吸光度问题，在显色反应中，某个干扰物与显色剂反应并产生干扰，使得吸光度变大。3、考虑做实验用的试剂和器皿受到污染。
大神的观点很精辟
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Ins_bc37ebf2
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2024/3/3 23:00:57 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 通标小菜鸟(v3141805) 发表:比色法出现斜率过大的原因：1、浓度问题，校正点中被测因子的实际浓度高于曲线浓度。2、吸光度问题，在显色反应中，某个干扰物与显色剂反应并产生干扰，使得吸光度变大。3、考虑做实验用的试剂和器皿受到污染。
谢谢大佬!因为可能也是我个人操作问题，已经排除了试剂干扰，空白组也已做，还是没办法做好这个标曲，所以换了其他文献参考做标曲，谢谢大佬们提的建议!????
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2024/3/3 23:01:31 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 等一个晴天(m3170710) 发表:斜率大，截距也很大，核查一下试剂有没有污染或者是开瓶时间较长，贮存不当变质了
谢谢大佬!因为可能也是我个人操作问题，已经排除了试剂干扰，空白组也已做，还是没办法做好这个标曲，所以换了其他文献参考做标曲，谢谢大佬们提的建议!
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2024/3/3 23:01:45 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ztyzb(zxz19900120) 发表:1、楼主没做零浓度点空白吗？考虑是纯水或者试剂的影响；2、建议自行配制标准品用有证标准标准溶液或者标准样品验证准确度，有可能是配制标准溶液本身的问题；3、考虑同步做仪器比对和人员比对查找原因。
谢谢大佬!因为可能也是我个人操作问题，已经排除了试剂干扰，空白组也已做，还是没办法做好这个标曲，所以换了其他文献参考做标曲，谢谢大佬们提的建议!????
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