主题：【分享】【金秋计划】结合指纹图谱结合主成分分析（principal components analysis，PCA）不同种质白芷适宜采收期及质量评价

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发表于：2024/09/10 11:33:23 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

不同种质白芷质量分析

本实验将各主产区的不同种质白芷引种遂宁白芷基地统一播种栽培，可以最大限度排除生长环境和栽培年限等因素的影响，差异的产生主要来源于种质的不同，即原种质遗传物质的差异。PCA和HCA结果显示，5个种质白芷被分为了2类，其中川白芷、南川白芷及亳白芷聚为一类，祁白芷、禹白芷聚为一类，推测原因，可能由于其基原和地环境有关。《中华本草》^[32]载：“杭白芷：产浙江杭州、余姚、临海；四川遂宁、达县、内江和重庆市亦产。产于四川者又称川白芷。祁白芷：产河北安国，河南长葛、禹县。产河南者又称禹白芷。”根据《遂宁县志》记载，川白芷距今已有400～600年的栽培历史，相传为明朝时期从浙江带回种籽（杭白芷）于四川遂宁栽培^[33]。由此可见，川白芷与南川白芷二者为同一基原，是《中国植物志》所载的杭白芷A. dahurica cv.‘Hangbaizhi’^[34]。禹白芷相比于川白芷栽培历史较短，但也有200余年，王梦月等^[35]经本草考证认为，明中期河南禹州开始有栽培白芷，应是华北一带的野生白芷A. dahurica经过驯化后形成的栽培品，祁白芷的栽培历史不早于20世纪30年代，可能是从河南引种栽培而得，其与禹白芷为同一品种A. dahurica cv.‘Qibaizhi’^[34]。而亳白芷栽培历史最短，大量栽培始于20世纪70年代末，由于安徽白芷产业的急速发展，各地引种导致其种质资源复杂，品质也参差不齐^[36-37]。不同种质白芷8种香豆素类成分含量测定结果表明，不同种质白芷成分存在较大差异，总香豆素含量显示：川白芷＞南川白芷＞亳白芷＞禹白芷＞祁白芷，说明川白芷在总香豆素类成分含量方面具有显著优势。不同种质白芷质量综合得分显示：川白芷F＞南川白芷F＞禹白芷F＞祁白芷F＞亳白芷F，结果表明川白芷质量最优，而亳白芷质量较差，可能是其基原混杂导致。传统认为，杭白芷、川白芷品质上乘，疗效更好。民国《药物出产辩》^[38]载：“产四川为正……有产浙江宁波杭州等，名杭芷，又名宁波芷,又名老头芷，味辛辣，不适用。有名会芷，产河南，如无川芷，则用会芷亦可。”因此，为了确保白芷药材质量，必须从源头把关，加强对白芷种质资源的管理，充分保障质量上乘的川（杭）白芷种质纯正。
1 材料1.1 仪器Ulti Mate 3000型高效液相色谱仪，美国Thermo Fisher公司；Agilent Zorbax Eclipse XDB-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）；KQ 500DE型超声波清洗器，昆山超声仪器有限公司；TD6M台式低速大容量离心机，常州金坛良友仪器有限公司；DHG-9245A型电热恒温鼓风干燥箱，上海善志仪器设备有限公司；BP210S型十万分之一电子天平、SQP型万分之一电子天平，北京赛多利斯科学仪器有限公司；JSCQHW型计重电子秤，昆山巨天仪器设备有限公司，YLS16A（pro）型烘干法水分测定仪，上海天美天平仪器有限公司；UPR-Ⅱ型四川优普超纯水机，四川优普超纯科技有限公司。1.2 药材与试剂将不同种质白芷的种子统一播种，在排除生长环境因素的影响的条件下评价其质量。所有白芷种子均引自河北安国、河南禹州、安徽亳州、四川遂宁、重庆南川等白芷道地产区及主产区，在四川省遂宁市川白芷科研示范基地进行统一播种管理，分别称为祁白芷（Q1～Q7）、禹白芷（Y1～Y7）、亳白芷（B1～B7）、川白芷（C1～C7）、南川白芷（N1～N7），于2021年3月～7月（3月28日、4月28日、5月30日、6月15日、6月30日、7月15日、7月30日）根据白芷不同物候期采集。本实验所用白芷药材均经成都中医药大学药学院裴瑾教授鉴定为伞形科植物杭白芷 A. dahurica (Fisch. ex Hoffm.) Benth. etHook. f. var. formosana (Boiss.) Shanet Yuan的新鲜根。白当归素（批号CHB210104）、佛手柑内酯（批号CHB201127）、氧化前胡素（批号CHB210113）、欧前胡素（批号CHB210108）、珊瑚菜素（批号CHB210106）、异欧前胡素（批号CHB210110），对照品均购于成都克洛玛生物科技有限公司，质量分数均≥98%。水为超纯水，甲醇、乙腈、甲酸均为色谱纯，美国Thermo Fisher公司；提取样品所用无水乙醇及其他试剂为分析纯，成都市科隆化学品有限公司。2 方法2.1 溶液的制备2.1.1 供试品溶液制备精密称取本品粉末（过三号筛）0.5 g，置50 mL锥形瓶中，加入50%乙醇溶液25 mL，超声处理（功率500 W、频率40 kHz）1 h，取出，放冷后加50%乙醇溶液补足减失的质量，摇匀，经0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。所有供试品溶液均在4 ℃条件下储藏。2.1.2 混合对照品溶液制备精密称取欧前胡素、异欧前胡素、珊瑚菜素、佛手柑内酯、氧化前胡素、白当归脑、白当归素、水合氧化前胡素对照品适量，加甲醇制成质量浓度分别为欧前胡素80 μg/mL、异欧前胡素99 μg/mL、珊瑚菜素70 μg/mL、佛手柑内酯61 μg/mL、氧化前胡素98 μg/mL、白当归脑126 μg/mL、白当归素75 μg/mL、水和氧化前胡素45 μg/mL的对照品溶液。混合对照品溶液在注入液相色谱仪前经0.22 μm微孔滤膜滤过。所有对照品溶液均在4 ℃条件下储藏。2.2 色谱条件色谱柱为Agilent C₁₈柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，安捷伦科技中国有限公司）；检测波长为254 nm；流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈，梯度洗脱：0～10 min，10%～25%乙腈；10～30 min，25%～50%乙腈；30～50 min，50%～65%乙腈；50～55 min，65%～10%乙腈；体积流量为1.0 mL/min；进样量为10 μL；柱温为30 ℃。

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