2.检出限的计算方法
半个世纪以来,人们在概念上都较为统一的接受了有关检出限的定义,但在如何正确或更准确地估算检出限的问题上,国际分析界一直存有争议,检出限的特殊意义在于可以对一个给定的分析方法在低浓度水平的检测能力进行准确地评估。考察一个分析方法在低浓度范围的检测性能,可以基于不同的角度或不同的侧重点,如可以从最小信号值与仪器噪音之比来考察;从方法测定空白的平均波动性来统计估算;也可以根据分析方法校准曲线的偏差特性来定量估算等等。从不同角度、不同侧重点考察得到的同一个分析方法的检出限可能相去甚远。作者总结了一下,检出限的计算方法主要有如下几种:
(1)国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)对检出限D.L作如下规定:
对各种光学分析方法,可测量的最小分析信号x.以下式确定:
X`=X+KS
式中:X` 一空白多次测得信号的平均值;
S一空白多次测得信号的标准偏差:
K一根据一定置信水平确定的系数。
与XL一 (即KSb)相应的浓度或量即为检出限:
D.L=( XL一 )/a=KSb/a
式中:r一方法的灵敏度(即校准曲线的斜率)。
为了评估xb和Sb,实验次数必须至少20次。
1975年,IUPAC建议对光谱化学分析法取K=3。由于低浓度水平的测量误差可能不遵从正态分布,且空白的测定次数有限,因而与K=3相应的置信水平大约为90%。此外,尚有将K取为4、4.6、5及6的建议。
(2) 《全球环境监测系统水监测操作指南》中规定:给定置信水平为95%时,样品测定值与零浓度样品的测定值有显著性差异即为检出限(D.L)。这里的零浓度样品是不含待测物质的样品。
D.L=4.60σwb
式中:σwb一空白平行测定(批内)标准偏差(重复测定20次以上)。
(3)美国EPA对方法检出限的描述为:能够被检出并在被分析物浓度大于零时能以99%置信度报告的最低浓度。方法检出限MDL的计算方法如下:
测定两组每组七个重复的低浓度加标样品,加标浓度一般为l一3倍MDL,两组样品的浓度相近,其方差经F检验无显著性差异;并按照给定分析方法的全过程进行处理和测定,计算公式为:
MDL=tν1+ν2,1-α×Spooled
ν1,ν2-自由度;
tν1+ν2,1-α-自由度为ν1+ν2的Student’st值(可查表得到),1-α为置信水平。
Spooled-合成标准偏差
若重复测定7次,置信水平为99%,查t值则可简化为MDL=3.143s。
(4)ISO对检出限的定义 :
分析方法的检出限是指:在给定概率,即P=95%,显著性水平为5%时,能够定性检出的最低浓度或量。ISO对出限的估算方法(简称VBx法)完全不同于以上方法,它是根据校准曲线的截距、剩余标准差、斜率及线性工作范围这些反映曲线的各类误差和回归特性的参量来定量描述的。当一条校准曲线作成后,对应曲线上每一个浓度点的置信限,每一个信号值的置信限都可以确定,经统计推导,可得到检出限Xn(具体计算可参考GBl7378-1998《海洋监测规范》中有关海水水质分析检出限的计算)。VBx法一般只需要根据一条校准曲线即可计算检出限,随着校准曲线的参数(条件)变化,检出限也发生变化,因而仅仅是个参考值,并不代表一种分析方法所能达到的最佳值。
(5)
气相色谱分析中的最小检测量系指检测器恰能产生与噪音相区别的响应信号时所需进入色谱柱的物质的最小值,一般认为恰能辨别的响应信号,最小应为噪音的两倍,最小检测浓度系指最小检测量与进样量(体积)之比;某些分光光度法中,以与扣除空白值后的0.01吸光度所对应的浓度值定为该方法的检出限;某些离子选择电极法规定:当校准曲线的直线部分外延的延长线与通过空白电位且平行于浓度轴的直线相交时,其交点所对应的浓度值即为该离子选择电极法的检出限。