(6)含氮化合物
①FCNP(硝普钠/铁氰化物)试剂
检出物:脂 肪族含氮化物,如氨基氰、胍、脲与硫脲及其衍生物,肌酸及肌酐。
溶液:10%氢氧化钠溶液、10%硝普钠溶液、10%铁氰化钾溶液与水按1:1:1:3混合,在室温至少放置20min,冰箱保存数周,用前将混合液与丙酮等体积混合。
②Dragendorff(碘化铋钾试剂)试剂
检出物:芳香族含氮化合物,如生物碱类、抗心律不齐药物。
溶液:I.碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中;Ⅱ.碘化钾8g溶于水20ml中。
将上述溶液I及Ⅱ等量混合,置棕色瓶中作为储备液,用前取储备液lml、冰醋酸2ml与水l0ml混合。
结果:呈橘红色斑点。
③4-甲基伞形酮
检出物:含氮杂环化合物。
溶液:本品0.02g溶于乙醇35ml,加水至100ml。
方法:喷板后置25%氨水蒸气的容器中,取出后于紫外灯(365nm)下观察。
④碘铂酸钾
检出物:生物碱类及有机含氮化物。
溶液:10%六氯铂酸溶液3ml与水97ml混合,加6%碘化钾溶液,混匀。临用前配制。
⑤硫酸高铈铵/硫酸
检出物:生物碱及含碘有机化物。
溶液:硫酸铈1g混悬于4ml水中,加三氯乙酸1g,煮沸,逐滴加入浓硫酸直至混浊消失。
方法:喷后薄层于1l0oC加热数分钟。
结果:阿朴吗啡、马钱子碱、秋水仙碱、罂粟碱、毒扁豆碱与有机碘化物均能检出。
⑥Ehrlich (对二甲氨基苯甲醛/盐酸)试剂
检出物:吲哚衍生物及胺类。
溶液:1%本品的浓盐酸溶液与甲醇按1:1混合。
方法:喷后板于50oC加热20min。
结果:呈不同颜色的斑点。
(7)胺类
①硝酸/乙醇
检出物:脂肪族胺类。
溶液:50滴65%硝酸于乙醇100ml中。
方法:需要时120oC加热。
②2,6-二氯醌氯亚胺
检出物:抗氧剂、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳氢化物、药物、苯氧基乙酸除草剂等。
溶液:新鲜制备的0.5%~2%本品乙醇溶液。
方法:喷后薄层于110oC加热10min,再用氨蒸气处理。
③茜素
检出物:胺类。
溶液:O.1%本品的乙醇溶液。
④丁二酮单肟/氯化镍
检出物:胺类。
溶液:I.丁二酮单肟1.2g溶于热水35ml中,加氯化镍0.95g,冷却后加浓氨水2ml;
Ⅱ.盐酸羟胺0.12g溶于200ml水中。
方法:将溶液I及Ⅱ混合,放置1天,过滤。
⑤Pauly (对氨基苯磺酸)试剂
检出物:酚类、胺类和能偶合的杂环化合物。
溶液:磺酸4.5g溶于温热的12mol/L盐酸45ml中,用水稀释至500ml,取lOml于冰中冷却,加4.5%亚硝酸钠冷溶液lOml,于OoC放置15min。用前加等体积10%碳酸钠溶液。
⑥硫氰酸钴(Ⅱ).
检出物:生物碱、伯、仲、叔胺类。
溶液:硫氰酸铵3g与氯化钴1g溶于水20ml。
结果:白色至粉红色背景上呈蓝色斑点,2h后颜色消退。若将薄层喷水或放入饱和水蒸气容器内,可重现色点。
⑦1,2-萘醌-4-磺酸钠
检出物:芳香胺类。
溶液:本品0.5g溶于95ml水,加乙酸5ml,滤去不溶物即得。
方法:喷后反应30min显色。
⑧葡萄糖/磷酸
检出物:芳香胺类。
溶液:葡萄糖2g溶于85%磷酸l0ml与水40ml混合液中,再加乙醇与正丁醇各30ml。
方法:喷后于115℃加热l0min。
(8)硝基及亚硝基化合物
①α-萘胺
检出物:3,5一二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺。
溶液:I.O.5%α-萘胺乙醇溶液;
Ⅱ.10%氢氧化钾甲醇溶液。
方法:先喷溶液I,再喷溶液Ⅱ。
结果:呈红褐色斑点。
②二苯胺/氯化钯
检出物:亚硝胺类。
溶液:1.5%二苯胺乙醇溶液与0.1g氯化钯的0.2%氯化钠溶液lOOml,按5:1混合。
方法: 喷后置紫外光(254nm)下观察。
结果:显紫色斑点。
(9)氨基酸及肽类
①茚三酮
检出物:氨基酸、胺与氨基糖类。
溶液:本品O.2g溶于乙醇l00ml中。
方法:喷后于110oC加热。
结果:呈红紫色斑点。
②茚三酮/乙酸镉
检出物:氨基酸及杂环胺类。
溶液:茚三酮1g及乙酸镉2.5g溶于l0ml冰醋酸中,用乙醇稀释至500ml。
方法:喷后于120oC加热20min。
③1,2-萘醌-4-磺酸钠
检出物:氨基酸。
溶液:临用前将本品O.02g溶于5%碳酸钠l00ml中。
方法:喷后室温干燥。
结果:不同氨基酸呈不同色点。
④靛红/乙酸锌
检出物:氨基酸与某些肽类。
溶液:靛红1g与乙酸锌1g溶于95%异丙醇l00ml中,加热至80oC,冷却后加乙酸1ml,冰箱保存。
方法:喷后于80~85"C加热30min。
⑤茚三酮/冰醋酸
检出物:二肽及三肽。
溶液:1%茚三酮吡啶溶液与冰醋酸按5:1混合。
方法:喷后于l00oC加热5min。
⑥香草醛
检出物:氨基酸及胺类。
溶液:I.本品1g溶于丙醇50ml中;
Ⅱ.1mol/L氢氧化钾溶液lml,用乙醇稀释至lOOml。
方法:先喷溶液I后于110oC干燥l0min,再喷溶液Ⅱ,于110oC再干燥l0min,于紫外光(365nm)下观察。
(10)甾类
①香草醛/硫酸
检出物:甾体激素。
溶液:1%香草醛浓硫酸溶液。
方法:喷后于105℃加热5min。
②氯化锰
检出物:雌激素类。
溶液:氯化锰0.2g溶于含硫酸2ml的甲醇60ml中。
方法:喷后置紫外光(365nm)下观察。
③高氯酸
检出物:甾体激素。
溶液:5%高氯酸甲醇溶液。
方法:喷后于110oC加热5min,置紫外光(365nm)下观察。
④三氯化锑/乙酸
检出物:甾类与二萜类。
溶液:三氯化锑20g溶于乙酸20ml与氯仿60ml混合液中。
方法:喷后于100oC加热5min,紫外光长波下观察。
结果:二萜类斑点呈红黄-蓝紫色。
⑤对甲苯磺酸
检出物:甾族化合物、黄酮类与儿茶酸类。
溶液:20%本品的氯仿溶液。
方法:喷后于100oC加热数分钟,紫外光长波下观察。
结果:斑点呈荧光。
⑥氯磺酸/乙酸
检出物:三萜、甾醇与甾族化合物。
溶液:氯磺酸5ml在冷却下加乙酸l0ml溶解。
方法:喷后于130oC加热5~l0min,置紫外光长波下观察。
结果;斑点显荧光。
(11)糖类
①茴香胺、邻苯二酸试剂
检出物:碳氢化合物。
溶液:1.23g茴香胺及1.66g邻苯二酸于l00ml 95%乙醇中的溶液。
方法:喷雾或浸渍。
结果:己糖呈绿色、甲基戊糖呈黄绿色、戊糖呈紫色、糖醛酸呈棕色。
②四乙酸铅/2,7一二氯荧光素
检出物:甙类、酚类、糖酸类
溶液:I.2%四乙酸铅的冰醋酸溶液;Ⅱ.1%2,7一二氯荧光素乙醇溶液。
取溶液I、Ⅱ 各5ml混匀,用干燥的苯或甲苯稀释至200ml,试剂溶液只能稳定2h。
方法:浸板。
③邻氨基联苯/磷酸
检出物:糖类。
溶液:O.3g邻氨基联苯加85%磷酸5ml与乙醇95ml。
方法:喷板后llOoC加热15~20min。
结果:斑点呈褐色。
④苯胺/二苯胺/磷酸
检出物:还原糖。
溶液:4g二苯胺、4ml苯胺与20ml 85%磷酸共溶于200ml丙酮中。
方法:喷后于85℃加热l0min。
结果:产生各种颜色。1,4-己醛糖、低聚糖呈蓝色。
⑤双甲酮/磷酸
检出物:酮糖。
溶液:双甲酮(5,5-二甲基环己烷-1,3-二酮)10.3g溶于90ml乙醇与l0ml 85%磷酸中。
方法:喷板后于110oC加热15~20min。
结果:日光下观察,白色背景上呈黄色斑点,紫外光长波下呈蓝色荧光。
⑥联苯胺/三氯乙酸
检出物:糖类。
溶液:0.5g联苯胺溶于l0ml乙酸,再加10ml40%三氯乙酸水溶液,用乙醇稀释至l00ml。
方法:喷后置紫外光下照射15min。
结果:斑点呈灰棕-红褐色。
⑦对二甲氨基苯甲醛/乙酰丙酮
检出物:氨基糖类。
溶液:I. 5ml 50%氢氧化钾溶液与20ml乙醇混匀,取此溶液0.5ml,加乙酰丙酮0.5ml与正丁醇50ml的混合液l0ml,此两种溶液均需新鲜配制,临用前混合;
Ⅱ. 1g对二甲氨基苯甲醛溶于30ml乙醇中,再加30ml浓盐酸,需要时此溶液可用正丁醇180ml稀释。
方法:先喷I后于105oC加热5min,再喷Ⅱ,然后于90℃干燥5min。
结果:斑点呈红色。