主题：分光光度计做蜂花粉的维生素C 的实验请各位前辈指出错误

我第一次用分光光度计做蜂花粉的维生素C 的实验，结果数据不成线性，而且出现了负值，下面是我做试验的步骤及方法，请各位前辈指出错误：
（1）A 样品制备：称1～4g样品放入乳钵内，加入10 g/L草酸溶液磨成匀浆，倒入100 mL容量瓶中，用10 g/L草酸溶液稀释至刻度，混匀。
    B  将A步骤中所得溶液过滤，滤液备用。
    C  氧化处理：
        取25 mL上述滤液，加入2 g活性炭，振摇1 min，过滤，弃去最初数毫升滤液。取10 mL此氧化提取液，加入10 mL 20 g/L硫脲溶液，混匀。
    D  呈色反应
        于三个试管中各加入4 mL稀释液。一个试管作为空白，在其余试管中加入1.0 mL【20 g/L】 2,4-二硝基苯肼溶液，将所有试管放入37±0.5 ℃恒温箱或水浴中，保温3h。
    E  3 h后取出，除空白管外，将所有试管放入冰水中。空白管取出后使其冷至室温，然后加入1.0 mL 【20 g/L】2.4-二硝基苯肼溶液，在室温中放置10～15min后放入冰水内。
    F  85％硫酸溶液处理：
    当试管放入冰水中后，向每一试管中加入5 mL 85％硫酸溶液，滴加时间至少需要1 min，需边加边摇动试管。将试管自冰水中取出，在室温放置30 min后比色。
    G 比色：
用1 cm比色杯，以空白液调零点，于500 nm波长下测吸光值。
  H  标准曲线绘制
  1  加2 g活性炭于50 mL标准溶液中，摇动1 min，过滤；
  2  取10 mL滤液放入500 mL容量瓶中，加5.0 g硫脲，用10 g/L草酸溶液稀释至刻度，抗坏血酸浓度20 mg/L;
  3  取5，10，20，25，40，50，60 mL稀释液，分别放入7个100 mL容量瓶中，用10 g/L硫脲溶液(4.10)稀释至刻度，使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为1，2，4，5，8，10，12 mg/L。
  4  按样品测定步骤形成脎并比色。按以上步骤每一浓度的标准样液一个空白，两个比色，7个浓度配了21个试管。（请问有必要做这么多试管样吗？）
（2）测试：
设定吸光值
分光光度计第一个比色池放的是黑体，第二个比色池放空白，第三，四个比色池放标准溶液比色。
用黑体在透射比方式下调0，然后拉入空白调百，然后测样的吸光度。
其他的也依次这样做了。

请各位前辈指出以上实验步骤的错误之处。


蜂花粉的维生素C测定