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紫外可见分光光度计（UV）

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主题：【求助】为什么同样条件下两天的吸光度却不同

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yzx2011

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发表于：2012/08/15 16:20:24 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

各位老师好：
这几天我和同事使用723分光光度计做水中碘化物的定值实验。在做标准曲线时，发现我们这几天做的吸光值都不相同（只同一浓度下所有条件均相同，仅相隔1到2天）现附实验数据：

时间	浓度	10μg/L	8μg/L	6 μg/L	4 μg/L	2μg/L	0μg/L
2012.8.13	吸光度1	0.345	0.430	0.516	0.656	0.799	1.017
2012.8.14	吸光度2	0.134	0.215	0.316	0.454	0.578	0.784

我们的样品处理方法是各取2ml标准液放入试管，加1ml过硫酸铵溶液，100度加热20min冷却后加亚砷酸1ml在31度下恒温15min。在加入硫酸铈铵1ml待半小时后测。我想问同样浓度同等条件下，为什么仅1到2天吸光值差这么多？是仪器原因吗？

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2012/8/15 17:06:23 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

两组数据主要是截距不同，斜率看上去相差不大，只是整个数据平移了。检查浓度零管吧，两天间不同了，是不是某一试剂问题？

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2012/8/15 17:07:12 Last edit by tutm

yzx2011

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2012/8/16 10:43:59 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tutm(tutm) 发表:
两组数据主要是截距不同，斜率看上去相差不大，只是整个数据平移了。检查浓度零管吧，两天间不同了，是不是某一试剂问题？

谢谢老师的指导，我再实验一下看看

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suiniubei

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2012/8/16 11:05:16 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tutm(tutm) 发表:
两组数据主要是截距不同，斜率看上去相差不大，只是整个数据平移了。检查浓度零管吧，两天间不同了，是不是某一试剂问题？

　我算了下，斜率相差不大．

　提醒注意一下：

１　你的浓度数值精度不行．　怎么可能是8ug/ml, 6ug/ml呢？后面至少有小数点啊．分析中一般是四位有效数字，至少也得三位．你的浓度精度太差，所以相关系数较差，才0.9834及0.9885．

2　你的浓度为0和管子的吸光度达到了1.0以上．对于普通的分光光度计来说，这个就很难成线性了．除非你用的是比较高级的分光计，像岛津2450这样的机子，或1800的，不然你是死活都做不成好的线性的。
　因此体系的浓度可适当降低。
　此外，10ug/ml那个点应丢掉，在中间可以插一个3ug/ml,或者1ug/ml的点较好。

3　线性不好的原因还有可能来自于你的操作。你量取液体时如果不准，就会导致线性不好。这个是关键。而在机器上，谁来测差别不大的。除非他操作失误。所以，最关键的不是仪器这部分，而是前面的操作部分。

4　吸光度不稳的原因很可能是物质分解。你可以考察一下。

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