主题:【学习心得之一】对于“影响质谱定量参数”的学习心得,抛砖引玉先!!!

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zhufangwei
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http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060406/385022/
我把它弄成附件的形式发出来
影响质谱定量参数


对于“影响质谱定量参数”的学习心得,抛砖引玉先!!!


本帖子结合“影响质谱定量参数”资料和具体的试验操作的学习心得

资料中指出影响质谱定量参数的7个大因素:

1、组成色谱峰的点      至少要在15-20之间,才能保证峰的稳定性,增加点的方式有:提高扫描速度,但是这样可能会导致检测限的下降。

我想作为方法建立者,只要基本上按照仪器提供的最优值就应该没有问题,虽然对我们影响不大,但我们至少要知道有这么回事,呵呵;

2、 离子喷雾的稳定性    离子源喷雾不稳定影响方法的优越性是显而易见的,流动相混合的不好、过长时间的流动相、喷雾毛

细管切口不好、聚酰胺突出均会导致该结果,切割倒是很重要的,必须切正。

我在使用中好像流动相是经过严格超声的,喷雾哪个地方的毛细管因为有时系统压力太大需要切割,但一般是切割的地方都是顺着过来的那端,没有动过喷雾口的那段,聚酰胺突出的情况也没有怎么去留意。

3、峰形就不说了,主要是会影响到积分的效果,峰形好的定量更好,峰形差选择积分点很难导致不稳定。

4、色谱分离  尽量将各个不同的物质分开,避免相互之间的抑制。

这点倒有值得斟酌,如果几个物质同时出,因为都是微量的,难道它们就不能都远远的达到被完全电离的程度吗?我想肯定是可以的,这也是质谱的优势嘛,尽量分开都说是可以提高灵敏度的。大家也来发表一下看法哈

5、流动相中添加物  要严格按照规则来,要使用挥发性的盐,如醋酸铵、甲酸铵等,尽量不使用TFA,尽量不使用离子对试剂。

6、内标的使用  可以减少每次操作中的误差,减小方法的变异系数,它说的是需要内标与该非同位素的药物分开,而我做试验
过程中也使用到了内标,它们两者是很难分开的,保留时间基本一样,还好的是母离子,子离子都不一样,都相差相同的数字。
如果遇到子离子相似的情况是不是像它说的那样呢,“The labeled standard should be “far” enough away from the non-labeled to avoid signal contribution of the abundance of the natural isotopes to the signal of the internal standard”,大家也来讨论一下啊!!!

7、质谱的分辨率  这个很重要,我们使用的TSQ好像是低分辨率质谱,不知道什么是高分辨率的质谱???呵呵
该帖子作者被版主 风之彩8积分, 2经验,加分理由:结合英语学习资料和大家探讨,很有意义!
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风之彩
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建议:可以把英文引上来,让大家可以看到原文(不是所有人都看过,看附件又不够直观),最好能先自己翻译一下,然后大家一起交流心得。
针对某一条,或是其中的某一句话,大家各抒己见
该帖子作者被版主 zhufangwei5积分, 2经验,加分理由:很宝贵的意见,大家都来提啊
风之彩
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我先来吧。
谈谈分辨率。
原文:
Mass Resolution
A,How can mass resolution help you? If you have a co-elution of near isobaric compounds, high resolution can help you separate them, if the resolution is high enough. If you do MS2 it is important that you have the possibility of high resolution with ms1 and ms2 not only in the ms2 mode . You need the high resolution in ms1 for high resolution precursor ion selection. If you don’t have this capability you can get a mixed product ion spectrum that will lead you to the wrong conclusions or wrong quan and calibration curve results.
A.大意:质谱的分辩率在你分析分子量相近而且在色谱柱上共同洗脱的物质时就很重要了。如果你做二级质谱,MS1和MS2都需要高分辨。因为你需要高分辨率来帮你选择母离子。如果你的质谱没有这个能力,那么你测得的质谱图可能就是混合物,你的定量和标准曲线就会不准。
所以,这就和上面提到的内标里面有一句话“The labeled standard should be “far” enough away from the non-labeled to avoid signal contribution of the abundance of the natural isotopes to the signal of the internal standard.”的意思差不多,如果你用同位素做内标,而你的质谱分辨率如果不够高,那么你就要尽量使他们分得开些,不然你的定量会不准,因为你无法保证你测得的信号完全来自你的样品而非他的同位素。


B,Isobaric compounds are compounds with the same nominal mass but with a different molecular formula. E.g. N2 and CO both have the same nominal mass of 28 amu. With a low resolution instrument these two compounds can not be separated. Actually the exact mass of N2 is 28.006148 and the exact mass of CO is 27.99491464 the mass difference is 0.01123336.
B.大意:某些物质有相同的分子量但是他们的分子式不同。如N2 和 CO ,分子量都是28,如果质谱的分辩率低,那么质谱就不能区分它们。但是实际上N2 的精确分子量是28.006148,而CO 的是27.99491464 ,他们的分子量差0.01123336.
高分辨的质谱一般就是LC-TOF, Q-TOF,FT-MS等,用的毕竟少,而且也很少用来定量。我们定量还是QQQ多,现在还有线性离子阱等,这就是需要我们在设定分辩率参数时根据需要来选择。
该帖子作者被版主 zhufangwei2积分, 2经验,加分理由:感谢参与
zhufangwei
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如果几个物质同时出,因为都是微量的,难道它们就不能都远远的达到被完全电离的程度吗?我想肯定是可以的,这也是质谱的优势嘛,尽量分开都说是可以提高灵敏度的。大家也来发表一下看法哈
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shiwenjiekey
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回复“如果几个物质同时出,因为都是微量的,难道它们就不能都远远的达到被完全电离的程度吗?我想肯定是可以的,这也是质谱的优势嘛,尽量分开都说是可以提高灵敏度的。大家也来发表一下看法哈
有奖励哦"
就像1楼说的那样,几个物质同时出现说明他们的性质或者结构式差不太多,即便是电离完全
如果你仪器的分辨率不够高,那么你测得的质谱图可能就是混合物,你的定量和标准曲线就会不准。
该帖子作者被版主 capinter6积分, 2经验,加分理由:感谢回答
netsking
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如果几个物质同时出,因为都是微量的,难道它们就不能都远远的达到被完全电离的程度吗?我想肯定是可以的,这也是质谱的优势嘛,尽量分开都说是可以提高灵敏度的。大家也来发表一下看法哈
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这种情况取决于不同的化合物. 有些化合物如果没有分离的很好, 会出现相互抑制. 在实验中遇到过这种现象.
xhcb2007
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如果几个物质同时出,因为都是微量的,难道它们就不能都远远的达到被完全电离的程度吗?我想肯定是可以的,这也是质谱的优势嘛,尽量分开都说是可以提高灵敏度的。大家也来发表一下看法哈
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这种情况取决于不同的化合物. 有些化合物如果没有分离的很好, 会出现相互抑制. 在实验中遇到过这种现象.


这个跟物质的量有关,大约泰勒锥表面能承受10e-6mol的离子。所以在痕量,比如说纳克级就不存在这种情况。但是微克级就会比较明显。
ie4680180
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zhufangwei
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原文由 ie4680180(ie4680180) 发表:
几个物质同时出,好像影响不大嘛


要看具体情况,理论上讲是会发生电荷抑制影响灵敏度的。
蓉城1帅
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原文由 shiwenjiekey(shiwenjiekey) 发表:
回复“如果几个物质同时出,因为都是微量的,难道它们就不能都远远的达到被完全电离的程度吗?我想肯定是可以的,这也是质谱的优势嘛,尽量分开都说是可以提高灵敏度的。大家也来发表一下看法哈
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就像1楼说的那样,几个物质同时出现说明他们的性质或者结构式差不太多,即便是电离完全
如果你仪器的分辨率不够高,那么你测得的质谱图可能就是混合物,你的定量和标准曲线就会不准。


这个液相分离  分不分得开影响质谱检测 个人觉得是这样的:
分不开:质谱检测噪音基质将影响 增大,也就是信噪比
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