因为本人目前主要从事
液相色谱的使用,因此,先向大家说一说
液相色谱。
主要参考清华大学分析仪器教程
在所有色谱技术中,
液相色谱法(liquid chromatography,LC)是最早(1903年)发明的,但其初期发展比较慢,在
液相色谱普及之前,纸色谱法、
气相色谱法和薄层色谱法是色谱分析法的主流。到了20世纪60年代后期,将已经发展得比较成熟的
气相色谱的理论与技术应用到
液相色谱上来,使
液相色谱得到了迅速的发展。特别是填料制备技术、检测技术和高压输液泵性能的不断改进,使
液相色谱分析实现了高效化和高速化。具有这些优良性能的
液相色谱仪于1969年商品化。从此,这种分离效率高、分析速度快的
液相色谱就被称为高效
液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC),也称高压
液相色谱法或高速
液相色谱法。
气相色谱只适合分析较易挥发、且化学性质稳定的有机化合物,而HPLC则适合于分析那些用
气相色谱难以分析的物质,如挥发性差、极性强、具有生物活性、热稳定性差的物质。
在生命科学的应用上,
液相色谱的使用远远大于
气相色谱。。。
广义地讲,固定相为平面状的纸色谱法和薄层色谱法也是以液体为流动相,也应归于
液相色谱法。不过通常所说的
液相色谱法仅指所用固定相为柱型的柱
液相色谱法。
通常将
液相色谱法按分离机理分成吸附色谱法、分配色谱法、离子色谱法和凝胶色谱法四大类。其实,有些
液相色谱方法并不能简单地归于这四类。表中列举了一些
液相色谱方法。按分离机理,有的相同或部分重叠。但这些方法或是在应用对象上有独特之处,或是在分离过程上有所不同,通常被赋予了比较固定的名称。
类 型 主要分离机理 主要分析对象或应用领域
吸附色谱 吸附能,氢键 异构体分离、族分离,制备
分配色谱 疏水分配作用 各种有机化合物的分离、分析与制备
凝胶色谱 溶质分子大小 高分子分离,分子量及其分布的测定
离子交换色谱 库仑力 无机离子、有机离子分析
离子排斥色谱 Donnan膜平衡 有机酸、氨基酸、醇、醛分析
离子对色谱 疏水分配作用 离子性物质分析
疏水作用色谱 疏水分配作用 蛋白质分离与纯化
手性色谱 立体效应 手性异构体分离,药物纯化
亲和色谱 生化特异亲和力 蛋白、酶、抗体分离,生物和医药分析