原文由 bjwanhua 发表:
总结了近几年测定某样品的出峰时间,总的波动范围在0.3min之内,而总结近一年的标准曲线,却发现标准品的出峰时间波动极大,同一个样品最大波动达到1.2min以上,最小也在0.3min以上,致使校正结果差别很大。不知大家有没有发生过这种情况。
不同时间段的实验结果肯定是会偏差的
但是不会偏差1.2或0.3min以上的 (冬天和夏天,两者的结果可能会有那么大偏差)
我们都是偏差0.03左右,最近我们发现室温对样品的保留时间影响是特别大的, 这大概就是室温引起了柱压的变化,后来我们严格控制柱压(压力波动控制在0.1MP)---这样做出来的结果比较稳定,但是对GPC测分子量来说,偏差0.03min 分子量偏差大概就有200-300左右了,因此做样品分子量的时候,还是需要用以前测过的样品或标样进行比对。
PS
还有我们也有用PEG(聚乙二醇)做标样,高分子量确实是很难溶解的,而且我们发现,加热溶解后,有些PEG峰会产生分裂(不知道是什么原因?),我个人觉的GPC对PEG可能会有保留,最近我们做的PEG峰,不管分子量相差多大,它们的保留时间基本上接近(也不知道什么原因?怀疑是保留引起的,请各位老师指正)。
个人建议:
测聚乙二醇系列样品的分子量最好用GFC(凝胶过滤色谱),PEG样品在GFC能很好的出峰。