EB的净化处理方法
小心:溴化乙锭是强诱变剂,并有中度毒性。取用含有这一燃料的溶液时务必戴上手套。这些溶液使用后应按下面介绍的方法之一进行净化处理。
(一)溴化乙锭浓溶液(即浓度>0.5mg/ml 的溴化乙锭溶液)的净化处理
方法Ⅰ: 用沙门氏菌——微粒体测定法表明。本方法可使EB的诱变活性降至原来的1/200 左右。
1)加入足量的水使EB的浓度降低至0.5mg/ml以下:
2)在所得的溶液中加入0.2体积的新配制的5%次磷酸和0.12体积的新鲜配置的0.5mol/L亚硝酸钠,小心混匀。切记:检测该溶液的pH值应<3.0,市售次磷酸一般为50%溶液,具有腐蚀性。应小心操作。必须在临用前现用现稀释。亚硝酸钠溶液(0.5mol/L)的配法:用水溶液34.5g亚硝酸钠并定容至终体积500ml,现用现配。
3)于室温温育24小时后,加入大大过量的1mol/L碳酸钠。该溶液可予丢弃。
方法Ⅱ: 用沙门氏菌——微粒体测定法检查,经用本方法处理后,可使EB的诱变活性降低至原来的1/3000左右。但也有报告称,在用净化溶液处理的空白样品中,偶尔有一些仍具有诱变活性。
1)加入足量的水使EB的浓度降低至0.5mg/L以下;
2)加入1倍体积的0.5mol/L KMnO4,小心混合后再加入1倍体积的2.5mol/L HCl小心混匀,于室温放置数小时;
3)加入1倍体积的2.5mol/L NaOH小心混合后可丢弃该溶液。
(二)EB稀溶液(如含有0.5ug/ml EB的电泳缓冲液)的净化处理
方法Ⅰ
1)每100ml溶液中加入2.9g Amberlite XAD-16,这是一种非离子型多聚吸附剂,可向Rohm & Haas公司购置;
2)于室温放置12小时,不时摇动;
3)用 Whatman 1号滤纸过滤溶液,丢弃滤液;
4)用塑料袋封装滤纸和Amberlite 树脂,作为有害废物予以丢弃;
方法Ⅱ
1)每100ml溶液中加100mg粉状活性炭;
2)于室温放置1小时,不时摇动;
3)用Whatman 1 号滤纸过滤溶液,丢弃滤液;
4)用塑料袋封装滤纸和活性炭;
注:用次氯酸(漂白剂)处理EB稀释液并不可取; EB在262℃分解,在标准条件进行焚化后不可能再有危害性; Amberlite XAD-16 或活性炭可用于净化被EB污染的物体表面