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主题：【讨论】关于Chromolith整体柱－灵敏度和流速的关系

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gemzar
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发表于：2009/04/01 21:38:23 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这段时间接触Merck的Chromolith柱，很感兴趣的是是在一篇文献《整体柱高效液相色谱法测定草甘膦原药中甲醛含量》中，由于使用Chromolith柱可以采用高流速(3mL/min)，相对于传统柱(0.8mL/min)的灵敏度提高了10倍(衍生化后紫外360nm检测)，按照文中的数据计算检测限已经达到了5ng/mL。就我个人理解，紫外检测器的极限基本上都在10ng/mL以上。因此准备尝试在血药测定时试试这种方法。
但这两天做某样品时发现，结果恰恰相反，在普通的色谱柱上(150×4.6，1.25mL/min)检测限可以达到10ng/mL，而Chromolith柱上(2.0mL/min)只有30ng/mL，而且高浓度下的样品，Chromolith柱的响应同样只有常规柱的1/3。
不知有没有兄弟在工作遇到过类似的问题，高流速到底会不会提高灵敏度呢？
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2009/4/2 9:49:53 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不是绝对的，跟柱子和被测组分都是有关系的
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gemzar
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2009/4/2 22:02:03 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
的确，我在实验中，只有在很极端的条件下(例如：由于保留时间很长主峰展宽很严重)，高流速会因为峰行比较尖锐而提高灵敏度；而绝大多数条件下，包括等度洗脱和梯度洗脱，末端吸收和300nm以上的吸收，高流速都导致灵敏度的降低，而根据紫外检测器的结构和其浓度型检测器的类别，高流速下更集中的样品带应该获得更高的灵敏度啊？
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