实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8040426今日发帖：55 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液相色谱（LC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】高效液相法测红霉素含量遇到问题

浏览0 回复9 电梯直达
kidant
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2009/10/28 10:50:26 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在用高效液相法测红霉素含量遇到问题，按照药典方法测，对照、样品中杂质C的峰基本找不到，也许是太小，暂时不管他，测含量时样品和对照主峰随着时间在变化，相差4、5个小时峰面积能差几倍？还有就是几天前配的标准品和新配的差异更大，标准品溶液是冷藏保存的，我记得抗生素基本都是测效价来定含量的，第一次用高效液相法测，问题不少，有做过这个产品的虫虫没？指点一下，十分感谢！
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 液相色谱(LC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
知足常乐！
wenshaowei-2008
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2009/10/28 13:20:26 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我原来做过红霉素的含量测定
没有你说的那种情况啊
也是按中国药典的方法测定
你是不是仪器系统的原因？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
kidant
kidant
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2009/10/28 15:26:50 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对照1：
制法：
取红霉素标准品10mg，置10ml量瓶中，加甲醇5ml溶解后，用磷酸　　盐缓冲液[取磷酸盐缓冲液(pH7.0)20ml，用磷酸溶液调节pH值至3.5]稀释至刻度，　　室温放置几天后，取20μl注入液相色谱仪。

对照2：
制法：红霉素标准品各约0.1g，精密称定，分别加甲醇5ml溶解，用磷酸盐缓冲液(pH7.0)-甲醇（15：1）定量稀释制成每1ml中约含4mg的溶液，作标准品溶液；精密量取标准品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪。

对照3：
制法：取红霉素标准品10mg，置10ml量瓶中，加甲醇5ml溶解后，用磷酸盐缓冲液[取磷酸盐缓冲液(pH7.0)20ml，用磷酸溶液调节pH值至3.5]稀释至刻度，室温放置2小时候，取20μl注入液相色谱仪。

样品：
制法：取本品约0.1g，精密称定，分别加甲醇5ml溶解，用磷酸盐缓冲液(pH7.0)-甲醇（15：1）定量稀释制成每1ml中约含4mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取供试品溶液与标准品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，


开始是选择6min左右的那个峰作为主峰，但是后面发现这个峰变得很小了，就怀疑选没选对。

对照1.pdf
对照2.pdf
对照3.pdf
样品.pdf
附件：
样品.pdf
对照3.pdf
对照2.pdf
对照1.pdf
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
kidant
kidant
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2009/10/28 15:27:26 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
agilent1200 DAD
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
有水有渝
xky0230699
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2009/10/28 21:19:48 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
怎么感觉像对照品变化了前移了，确定缓冲盐的PH调节没有差错，加柱温了没有？离子对试剂可能不稳定。
这个图可以参考一下：
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Last edit by xky0230699
知足常乐！
wenshaowei-2008
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2009/10/29 10:36:27 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 kidant(kidant) 发表:
对照1：
制法：
取红霉素标准品10mg，置10ml量瓶中，加甲醇5ml溶解后，用磷酸　　盐缓冲液[取磷酸盐缓冲液(pH7.0)20ml，用磷酸溶液调节pH值至3.5]稀释至刻度，　　室温放置几天后，取20μl注入液相色谱仪。

对照2：
制法：红霉素标准品各约0.1g，精密称定，分别加甲醇5ml溶解，用磷酸盐缓冲液(pH7.0)-甲醇（15：1）定量稀释制成每1ml中约含4mg的溶液，作标准品溶液；精密量取标准品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪。

对照3：
制法：取红霉素标准品10mg，置10ml量瓶中，加甲醇5ml溶解后，用磷酸盐缓冲液[取磷酸盐缓冲液(pH7.0)20ml，用磷酸溶液调节pH值至3.5]稀释至刻度，室温放置2小时候，取20μl注入液相色谱仪。

样品：
制法：取本品约0.1g，精密称定，分别加甲醇5ml溶解，用磷酸盐缓冲液(pH7.0)-甲醇（15：1）定量稀释制成每1ml中约含4mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取供试品溶液与标准品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，


开始是选择6min左右的那个峰作为主峰，但是后面发现这个峰变得很小了，就怀疑选没选对。

对照1.pdf
对照2.pdf
对照3.pdf
样品.pdf

方法没有问题啊
你做的图谱不对啊
你选用的是什么柱子啊？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
知足常乐！
wenshaowei-2008
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2009/10/29 10:39:08 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做出来的图谱应该就像4楼的那样
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
xiaoqing5182001
xiaoqing5182001
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/4/8 14:11:35 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢!!!!
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
雨诗baby
v3110244
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2016/6/3 9:10:10 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主做液相用的什么条件呢“求分享
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
有水有渝
xky0230699
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2016/6/3 9:29:56 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 雨诗baby(v3110244) 发表:
楼主做液相用的什么条件呢“求分享



详细参看现行2015版药典 红霉素 部分
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【求助】高效液相法测红霉素含量遇到问题
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁