主题：【分享】高效液相色谱方法转移篇|关于分析方法确认和转移评估标准探讨的小知识

浏览0 回复0 电梯直达

p3203140

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

发表于：2024/11/01 11:03:47 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

前面讲了分析方法转移的概念、流程、对比方式、判断标准等相关内容，其实最终的目的还是要对转移是否成功进行判定。
01.方法确认 / 转移的指标选择
1）推荐采用方法总变异度指标建议对准确度和精密度采用联合考察的方式，即通过计算方法的总变异度。这种方法改变了目前割裂完整设计的确认/转移实验操作方式，并且对方法在实验室内部的持续确认或向新实验室的转移尤为重要且便利。
2）推荐使用线性回归的预测下限指标在杂质检查过程中应该对检测下限（LOD）和定量下限（LOQ）进行考察。USP <1210> 建议采用上述实验设计过程获得的线性预测下限作为LOD，这被认为更具科学可靠性。
3）无需对专属性进行考察确认/转移过程是对经验证过的方法的性能进行考察，检测方法所对应的产品已经被充分确证，故专属性对定量检测方法不是考察重点（非鉴别类方法）。无论确认或转移，都是用自身属性一致的样品进行确证，所以在检测时可以同时进行确证过程，无需再重点考察专属性。02.方法确认 / 转移与验证方案的异同
1）方法验证
a.目的：确保方法在实际应用中能够产生准确、可靠和一致的结果。
b. 要求：通常包括准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和稳健性等多个方面的评估。
c. 设计考量：需要对实验人员、仪器和主要试剂等主要变异源进行多因素的全面联合评价，属于多因素的正交设计或嵌套设计。
2）方法确认
a.目的：确认方法在特定实验室环境中的有效性。
b. 要求：通常关注方法的适用性，可能不需要全面验证所有性能指标。
c. 设计考量：不需要进行全面的多因素设计，仅需实验人员在规定条件下独立重复即可达到确认评估目的。
3）方法转移
a.目的：确保不同实验室间方法的一致性和可靠性。
b. 要求：类似于方法确认，但更侧重于实验室间的转移能力。
c. 设计考量：同样不需要进行全面的多因素设计，而是在新实验室中重复原有实验室的验证过程，以证明方法的可转移性。
相同点：

目的都是为了确保分析方法的有效性和适用性。
都涉及到对方法性能的评估，如准确度和精密度。
都需要实验操作和数据分析。

不同点：

范围和深度：方法验证更为全面和深入，需要评估更多的性能指标，而方法确认和转移则更侧重于特定条件下的适用性。
设计复杂性：方法验证需要多因素设计，而方法确认和转移则相对简单，不需要全面评估所有变异源。
目的和应用场景：方法验证是为了证明方法的普适性，方法确认是为了证明方法在特定实验室的适用性，方法转移是为了证明方法在不同实验室间的一致性和可靠性。

03.方法确认 / 转移成功的标准
1）推荐采用等效检验方式作为判定标准根据方法检测的报告值所在的等效区间（包含预测区间和容忍区间）方式，可以更好地回答方法检测能力是否等效的问题。USP <1210> 在方法验证时给出报告值的预测区间（prediction interval）和容忍区间（tolerance interval）进行判定，可以更直观且有效地判定确认/转移时方法能力是否满足其实际用途。
预测区间=

公式：X拔表示标准样品均值；SD 为样本标准差；n 为样本量；t 为在n 样本量时（1+p）/2的 t 临界值；P 为区间所含报告值的百分率。
容忍区间=

公式：X拔表示标准样品均值；SD 为样本标准差；k 为包含因子（可通过公式或查表获得）

2）推荐采用方法能力指数作为判定标准

方法能力指数（MCI）：采用方法能力指数的方式可直观地确定所确认或转移的方法在具体使用中的误判风险。MCI是反映方法能力满足方法预期要求的能力指数。

公式中，USL 为特性量值（检测指标）限度标准的上限，LSL 为特性量值限度标准的下限，σ_method为方法总变异，SD_method为样本变异或样本标准差。

判定指标：如果MCI大于1，表明该方法在实际应用时，发生误判的概率低于0.27%，是能接受的。
04.示例分析

从表 1 可见，在 90.0%~110.0% 的范围内，其方法总变异最大者在 110.0% 浓度下，为 0.78%，预测区间为 99.52%~101.63%，容忍区间为 98.93%~102.22%；这时的方法能力指数为 4.28，说明该方法导致的误判率可以忽略不计，完全满足检测需要。

如果在方法确认 / 转移中，各浓度点的检测结果在99.52%~101.63% 预测区间范围内，则认为该方法的确认或转移成功（图 1-A 区域）；

如果其检测结果超出 98.93%~102.22% 的容忍区间范围，则认为方法确认或转移失败（图 1-C 区域）；如果其检测结果介于98.93%~99.52% 或 101.63%~102.22% 的预测区间和容忍区间范围之间，则应引起确认 / 转移实验者的注意（图 1-B 区域）。