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主题：【分享】从液相色谱方法转换为液相色谱-质谱联用方法中的液相方法的注意事项

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hujiangtao
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发表于：2024/11/01 10:19:52 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
质谱端的变化
    a.流动相的组分：液相色谱方法中常使用的缓冲盐体系，但转换为液相色谱-质谱联用方法时，因盐对质谱的损伤较大，同时目前液相色谱-质谱联用仪的液相色谱部分较多采用的是超高效液相色谱，使用的色谱柱内径较细，柱压较高。因此在转换过程中要重点关注流动相中涉及的盐成分。如果必须使用盐作为流动相组分，则一定要避免使用不可挥发性盐，且采用可挥发性盐进行替代时也要在用量上控制在最低水平。
b.离子化效率的影响：液相色谱-质谱联用法的流动相组成还要考虑对质谱端离子化效率的影响。如离子对色谱法和离子抑制色谱法的流动相不能直接转换到液相色谱-质谱联用法上，避免流动相中的离子太多，对仪器造成污染，对样品中的离子响应影响较大。使用电喷雾离子源电离时，当采用正离子扫描方式时，流动相的pH最好小于6.0，以有助于提高离子化效率，同时不能在流动相中添加三乙醇胺等表面活性剂；当采用负离子扫描方式时，pH最好大于8.0，同时，流动相中不能加入容易形成酸根负离子等物质，如三氟乙酸等。
c.流速：质谱部分一般对电喷雾离子化源来说流速不超过0.5mL/min为宜；对于大气压化学电离源来说流速不超过1.0mL/min为宜。切当高效液相色谱法转换为超高效液相色谱-质谱联用法时，因仪器的管路内径、色谱柱内径、色谱柱填料的粒径等参数的不同，而导致的两者流速的不通用。
d.梯度设置的影响：当采用梯度方法时，需考虑转换到液相色谱-质谱联用方法时在低流速条件下，样品溶液从泵腔到色谱柱前端这部分体积对色谱分离分析的影响，以及流动相从梯度程序中返回初始状态时所需要平衡时间的问题。
（2）不同液相色谱的变化
目前实验室使用的液相色谱仪主要为高效液相色谱仪和超高效液相色谱仪。所以在方法转换过程中要根据仪器的不同进行相应参数的调整，主要涉及流速、进样量、系统压力限制范围、采集时间、梯度平衡等方面。若采用同一仪器公司的高效液相色谱仪和超高效液相色谱仪检测，可以通过仪器自带的转换软件进行方法的转换，以软件转换的液相方法作为参考，再根据实际情况以及检测结果进行调整。
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