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主题：【分享】UPLC_MS/MS法分析β淀粉样蛋白中Asp残基的外消旋化

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zhangyongmei
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发表于：2024/11/01 12:43:02 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
目的:建立β淀粉样蛋白中Asp外消旋化的LC-MS/MS分析方法。方法:采用胰蛋白酶和Glu-C酶两步酶解β淀粉样蛋白,酶解产物LC-MS/MS分析的色谱条件:分离柱为InfinityLab Poroshell120EC-C18 色谱柱(2.7 μ m,3.0 x150 mm Agilent),流动相A为 5%乙腈 -0.1%甲酸水,流动相B为75%乙腈-水,梯度洗脱(0~30 min，0~28% B;30~30.01 min,28%~100% B;30.01~35 min,100%~100% B;35.0~35.01 min,100%~0% B;35.01~40 min,0%B)，流速为 0.3 mL/min。质谱条件:采用电喷雾离子源及正离子多反应监测模式(SRM)定量。结果:在L型多肽存在下，D型多肽的质量浓度在1~250ng/mL内,其峰面积与多肽的质量浓度之间线性良好(r>0.999),最低定量限(LLOQ)为1ng/mL;LLOQ、低(LQC)、中(MQC)、高浓度(HQC)日内和日间精密度RSD值均小于15%,加样回收率为85.3%~107.3%。建立的方法对D/(D+L)型淀粉样蛋白为2%~50%的混合样本中Asp1,Asp23外消旋化测定结果准确,准确度在95.35%~117%之间。联合胰蛋白酶与Glu-C成功鉴定了淀粉样蛋白中Asp7残基的外消旋化。结论:所
建立的方法可用于淀粉样蛋白中Asp残基外消旋化的分析,该方法操作简便,结果准确,灵敏度高。
附件：
UPLC_MS_MS法分析_淀粉_..._白中Asp残基的外消旋化_朱昌龙.pdf
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