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主题：【原创】流速对色谱峰面积的影响

浏览0 回复11 电梯直达
landy86
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发表于：2010/01/02 15:08:24 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
手头在做一个小分子肽的质量标准，遇到一个问题是：采用210nm波长，同一浓度流速为1.5ml/min时峰面积接近200，当流速为1ml/min时峰面积变成320左右，这两个流速交叉换了几次都是这种情况。之前知道流速对峰响应有影响，但是峰面积差这么多的情况还是第一次遇到。
    我的解释是：
    1.HPLC的原理是根据样品在不同流动相中的溶解度不同而达到分离，峰面积代表了样品含量的多少，流速增加则流动相中溶解的样品相应减少，峰面积变小；
    2.峰面积的响应值是根据检测器对样品和流动相相应的相对差值得到的，我采用的210nm检测波长靠近末端吸收，流速对这种相对差值的影响更加灵敏。
    一点点拙见，不恰之处望大家指正。
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emoc98311
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2010/1/2 15:11:20 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
其它物质也这样,不知道为什么?
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有水有渝
xky0230699
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2010/1/2 15:25:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我想峰面积应该差不多吧，但你的面积只有200这么小也积分吗？
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Allen
lwbcpu
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2010/1/2 15:32:02 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不知降低流速之后峰展宽如何
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remioromen
remioromen
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2013/5/21 11:38:08 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
求解。。。。
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yzulcl
yzulcl
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2013/5/21 20:36:25 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
浓度型检测器就是这样的，峰面积与流动相的流速有关（大致成反比）。
质量型检测器就不一样了，峰面积与流动相的流速无关。
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Sykren
kuangren1193
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2013/5/22 13:52:45 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不知道你的为什么
我以前试过，只是峰形会有变化，峰面积没明显的改变
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2013/5/22 14:14:44 Last edit by jncxyy2012
三人行
jncxyy2012
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2013/5/22 14:15:45 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Sykren(kuangren1193) 发表:
不知道你的为什么
我以前试过，只是峰形会有变化，峰面积没明显的改变


峰面积会改变。
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有水有渝
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2013/5/22 17:25:39 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
原文由 Sykren(kuangren1193) 发表:
不知道你的为什么
我以前试过，只是峰形会有变化，峰面积没明显的改变


峰面积会改变。


流速改变导致保留时间改变，流速降低，色谱峰被展宽，峰面积变大，但这个变大与流速是非线性关系的，因为峰展宽的同时，峰高会降低。
该帖子作者被版主 jncxyy2012加 2积分， 2经验，加分理由：言之有理
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2013/5/22 17:25:54 Last edit by xky0230699
xiaowang268
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2013/5/24 20:11:27 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
面积还是不怎么变化吧
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p3336114
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2021/3/9 10:06:53 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我试了一下，降低流速后峰面积和峰高都发生了很大的变化，但是觉得有点不合理
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