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原子荧光光谱（AFS）
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主题：【求助】求助：分析法问题！

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发表于：2010/03/24 13:48:49 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家好，小弟有点小事咨询下，荧光分析法和荧光探针法是什么关系？？谢谢大家。
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2010/3/24 14:58:44 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不是原子荧光吧？是分子荧光？
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2010/3/24 15:16:24 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不好意思，发错了，大侠能给详细回答我一下吗？
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2010/3/24 15:53:52 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
荧光分析法　　利用某些物质被紫外光照射后所发生的能反映出该物质特性的荧光，
　　可以进行定性或定量分析的方法。
　　特点：灵敏度更高 10-10-10-12g/ml，应用不如UV广泛。
　　应用：①直接荧光光度法
　　②作为HPLC的检测器（用的多）
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2010/3/24 15:54:16 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
《精细化学品化学》 沈永嘉主编 293页这么写的：
一种借助探针分子的光物理和光化学性质对微环境变化的敏感性在分子水平上研究生物体内结构变化的方法。
百度百科上：
在紫外-可见-近红外区有特征荧光，并且其荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质，如极性、折射率、黏度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子，包括有机试剂或金属螯合物。
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2010/3/24 17:06:38 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
荧光分析法

某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波长较长的荧光。物质的激发光谱和荧光发射光谱，可以用作该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系，可以用作定量分析。荧光分析法的灵敏度一般较紫外分光光度法或比色法为高，但浓度太大的溶液会有“自熄灭”作用，以及由于在液面附近溶液会吸收激发光，使发射光强度下降，导致发射光强度与浓度不成正比，故荧光分析法应在低浓度溶液中进行。

所用的仪器为荧光计或荧光分光光度计，按各品种项下的规定，选定激发光波长和发射光波长，并配制对照品溶液和供试品溶液。

由于不易测定绝对荧光强度，故荧光分析法都是在一定条件下，用对照品溶液测定荧光强度与浓度的线性范围后，再在每次测定前，用一定浓度的对照品溶液校正仪器的灵敏度；然后在相同的条件下，分别读取对照品溶液及其试剂空白的荧光读数与供试品溶液及其试剂空白的荧光读数。
对易被光分解或驰豫时间较长的品种，为使仪器灵敏度定标准确，避免因激发光多次照射而影响荧光强度，可选择一种激发光和发射光波长与之近似而对光稳定的物质配成适当浓度的溶液，作为基准溶液，例如蓝色荧光可用硫酸奎宁的稀硫酸溶液，黄绿色荧光可用荧光素钠水溶液，红色荧光可用罗丹明Ｂ水溶液等。在测定供试品溶液时用基准溶液代替对照品溶液校正仪器的灵敏度。

荧光分析法因灵敏度高，故干扰因素也多。溶剂不纯会带入较大误差，应先作空白检查，必要时，应用玻璃磨口蒸馏器蒸馏后再用。溶液中的悬浮物对光有散射作用，必要时，应用垂熔玻璃滤器滤过或用离心法除去。所用的玻璃仪器与测定池等也必须保持高度洁净。温度对荧光强度有较大的影响，测定时应控制温度一致。溶液中的溶氧有降低荧光作用，必要时可在测定前通入惰性气体除氧。测定时需注意溶液的pH值和试剂的纯度等对荧光强度的影响。
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2010/3/24 17:08:10 Last edit by coffee8
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