【讨论】关于色谱柱填料的“孔径”？

liaoxiaozi

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2010/6/13 9:34:37 11楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

使用单体的要控制好用量需计算柱子体积恰好都装进去

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zxhcnf

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2010/6/13 12:14:12 12楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 小卢(luxw) 发表:
原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
这个问题是选择柱子的时候首先要考虑的，选择什么样填料孔径的柱子是根据分子量的大小来确定的。我们先了解一下填料孔径对分离度有什么样的影响，120A的色谱柱通常适用的范围为分子量<10000的，如果分子量太大，在填料为120A孔径的柱子上分离度会比较差，因为样品分子在色谱柱上有较好的是由于可以进入到填料的微孔里面，与键合在表面上的C18长链相互作用，通常孔径直径需要大于分子直径的3倍以上才不会对分析造成影响。
因此一般分子量10000一下的化合物建议用120A的柱子来分析，分子量大于1W小于20W的用300A的来分析，分子量大于20W的就要用凝胶柱了。

z版很专业啊！对于中药来说，杂质多，成分复杂，选择什么比较好呢？

中药成份的化合物通常分子量不会太大，120A孔径的柱子应该足够了。我们选柱子的时候很少问孔径，因为分析大分子的机会并不是很多，这个时候60A、80A、100A、120A对分离都不会有太大的影响，倒是色谱柱封尾不封尾、载碳量大不大这些考虑得更多一些，因此没有特殊说明通常我们都会默认为是、80A、100A、120A这种。现在做多肽的越来越多，考虑到多肽通常分子量比较大的原因，他们选柱子的时候通常首先就考虑孔径的问题。

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2010/6/13 12:15:50 Last edit by zxhcnf

阿宝

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2010/6/14 15:43:40 13楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

到底孔径对柱效有影响还是对分离有影响？或者对峰型有影响？

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fulinx

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2010/6/21 19:14:36 14楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 小卢(luxw) 发表:
原文由 fulinx(fulinx) 发表:
孔径大小影响峰形！300A填料分析大分子物质的样品时可以明显改善峰形！比方说蛋白质，多肽！

也就是说孔径越大，对大分子分离越好？

能改善峰形，但是不一定改善分离，相反孔径越小，分离度一般越好！看下面例子：

该帖子作者被版主 samanthalas加 5积分， 2经验，加分理由：感谢分享！

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yongw

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2010/6/22 10:53:59 15楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

图谱的横坐标，好像时间不一致，一个是5分钟，一个是10分钟

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fulinx

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2010/6/22 22:30:34 16楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 yongw(yongw) 发表:
图谱的横坐标，好像时间不一致，一个是5分钟，一个是10分钟

呵呵，这横坐标不都是10分钟吗？您可看仔细了。

该帖子作者被版主 samanthalas加 10积分， 2经验，加分理由：活跃分子，再加10分！

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zxhcnf

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2010/6/23 13:26:14 17楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

fulinx的这个例子太好了，非常清楚明了的解释了孔径对分析的影响，感谢您的分享，谢谢！

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fulinx

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2010/6/23 22:05:00 18楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
fulinx的这个例子太好了，非常清楚明了的解释了孔径对分析的影响，感谢您的分享，谢谢！

谢谢版主！经常来咱们坛子转转真的能学到不少东西啊！特别是版主总结性的东西，我都收集起来了，呵呵。。。

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samanthalas

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2010/6/24 11:58:32 19楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 fulinx(fulinx) 发表:
原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
fulinx的这个例子太好了，非常清楚明了的解释了孔径对分析的影响，感谢您的分享，谢谢！

谢谢版主！经常来咱们坛子转转真的能学到不少东西啊！特别是版主总结性的东西，我都收集起来了，呵呵。。。

那就加入我们版的居民队伍吧！还有每月20积分的居民津贴发放！

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