主题：【极限体验】四种不同C18色谱柱对京尼平苷检测结果的简单分析（6月份）

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发表于：2011/06/09 16:56:41 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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1. 发贴背景
京尼平苷——最为典型的环烯醚萜类化合物之一，事实上，去掉最后“之一”两个字，也不为过。
京尼平苷具有众多的药理活性，像什么保肝利胆，像什么抗炎镇静等等，甚至最近的研究表明，它还具有一定的抗老年痴呆活性等等。这么多药理活性，你信么？好吧，我要告诉你，药理作用就是扯淡，平时说着玩一玩是可以的，正式场合。。。还是谈点正经地比较好。
不管怎么样，给个京尼平苷的结构吧。。

2. 仪器与试剂
甲醇：天津大茂产的色谱甲醇
水：娃哈哈纯净水
HPLC：忘了抄型号了，汗

3. 色谱条件
流动相：A泵甲醇、B泵水溶液；
流速：A泵0.2ml/min、B泵0.8ml/min；
柱温：柱温箱30度恒温；
检测波长：230nm；
进样量：5微升；
色谱柱：Ultimate XB-C18柱(5μm， 4.6x250mm)
某色谱柱一（国产品牌）(5μm，4.6x250mm)
某色谱柱二（国产品牌）(5μm，4.6x250mm)
某知名色谱柱三（国外品牌）(5μm，4.6x250mm)

4. 样品处理
京尼平苷标准品由本人提取分离纯化得到，纯度99.5%以上。取少量用甲醇溶解，过滤备用。

5. 实验结果
某国产品牌一分析结果如图所示

某国产品牌二分析结果如图所示

某国外品牌分析结果如图所示：

Ultimate XB-C18柱分析结果如图所示：

6. 小结与讨论（下面将结合我对柱子的实际需求，对色谱柱的柱压、保留时间、柱效进行比较）
6.1 柱压比较
国产品牌1和国产品牌2压力较低，双泵泵压均为16MPa左右，单从压力的角度来说，这是一个不错的结果。与之相对的是，某国外品牌色谱柱的柱压，双泵压力均高达26MPa左右，这是让人不太满意的结果。耐人寻味的是，Ultimate XB-C18柱的压力为20MPa，大小左右介于二者之间，且更偏向于前者，这个结果，是完全可以接受的。

6.2 保留时间比较
对我而言，分析液相的结果将用于指导制备液相条件的确定。保留时间太短，在降低甲醇比例分离多组分的样品时，此类色谱柱将不具备优势，比如，用10%甲醇水时样品在10min内就出峰，将来要“往后拖”的时候，就只有5%甲醇水等选择了（换柱子不太可能）；相反，如果保留时间太长，“往后拖”分离多组分样品时，制备液相的出峰时间将变得极其漫长，这是不可接受的。从分析结果来看，如果要购买制备色谱柱，本人将不考虑国产品牌2（这段估计看着很费劲吧，汗）。

6.3 柱效比较
本人极其厌烦理论塔板数一类的东西，简单明了干净利落是我追求的风格。关于柱效，最简单的说法就是，峰宽越窄峰高越高柱效越好。从图中可以看出，国产品牌1柱效过低，明显不适合用于分离此类化合物（国产品牌2色谱柱有点旧，此处不参与比较）；Ultimate XB-C18柱的柱效跟某知名国外品牌基本相当，或者说，略好。

7. 结论
通过以上比较得出结论，以后在选择制备型液相色谱柱（限文中提到的4种品牌）的时候，某国产色谱柱保留时间太短，将不予考虑；另一国产色谱柱由于对此类样品的分离柱效太低，将不予考虑；在对柱压没有太大要求的情况下，Ultimate XB-C18和某国外品牌将成为考虑的对象。如果是对柱压有要求（嫌高），那么Ultimate XB-C18将会成为唯一的选择。