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主题：【第六届原创】氨基酸，为什么不给我液相的国家标准方法

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老多_小多
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发表于：2011/07/21 13:55:11 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
维权声明：本文为emoc98311原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。
坛子里经常有版友问检测氨基酸的问题，我就奇怪，为什么那么多液相色谱测定的方法，国家标准方法却没有用液相测定氨基酸的，国家标准都是用氨基酸分析仪来测定，也很复杂，也很复杂呀，然后液相成了大众仪器的年代，居然没有一个标准方法。氨基酸分析仪标准方法检测天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸等十六种氨基酸，人体必需的是18种，标准方法也是有缺陷啊。

好了，先不讨论标准方法了，我就摆弄摆弄，给大家参考下，其实氨基酸分析没那么复杂。食物中含有大量非氨基酸的其它成分如有机酸、脂肪、蛋白质等，它们都会干扰氨基酸的色谱测定。有人说：在测定之前，需要脱蛋白及浓缩、净化等样品前处理。我在想，有这个必要么？还有的人说，液相做氨基酸得用氨基酸专用色谱柱，这个是否又有必要呢？我几个图给大家看看吧。采用了2个不同的色谱柱做的比较，一个是氨基酸专用柱，一个是普通C18柱，两个色谱柱均是上海月旭公司一个厂家的，这样具有比较性。

一、Ultimate AA，（4.6m*250mm，5um）



二、Topsil C18，（4.6m*250mm，5um）



图谱怎么样，让让大家评论吧氨基酸的测定，具有代表性的用柱前衍生的方法，包括有用衍生试剂的邻苯二甲醛、异硫氰酸苯脂、荧光胺、氯化丹酰等，还有AccQ-Tag法。反应操作各不相同，有的在室温下只须混合即可快速反应，有的在反应中必须加热，还有的反应后必须净化等。

大家都用什么方法呢，做的效果如何呢？你认为国家标准没有液相色谱法测定氨基酸是否合理呢？
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雪妖
czj_1027
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2011/7/21 14:40:33 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得国家的标准很多都已经很旧了，根本就不能代表当前最适合最合理的检测方法，这种应该及时更新取代

老多，你的结果表这么一模一样，是不是发错了
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ld321
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2011/7/21 14:42:59 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
LC做氨基酸分析仪的重现性不好！不同人的定量结果差异较大！

另外，国家标准没有老，反而出台了相关的鉴定规程来检定仪器，确保检测结果的准确性可比性，氨基酸分析远比想象中负责。
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2011/7/21 14:46:00 Last edit by ld321
老多_小多
emoc98311
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2011/7/21 14:46:26 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 雪妖(czj_1027) 发表:
我觉得国家的标准很多都已经很旧了，根本就不能代表当前最适合最合理的检测方法，这种应该及时更新取代

老多，你的结果表这么一模一样，是不是发错了

果真是错了，马上改
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pengliying851
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2011/7/21 16:28:26 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有没有单胺的液相标准，呵呵，
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pengliying851
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2011/7/21 16:30:16 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我同学测的氨基酸，也会有个杂峰在里面，很高峰型很漂亮的杂峰。
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老多_小多
emoc98311
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2011/7/21 17:34:28 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那个漂亮的杂峰是衍生试剂峰
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glory143
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2011/7/21 17:56:29 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这是用什么衍生剂，什么牌子的液相做的？我们的氨基酸重复性有很大问题
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yanlele3207
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2011/7/21 19:17:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我在用安捷伦的液相测苏氨酸的含量，发现了很多的问题，第一，出峰时间不一样。第二，甘氨酸和苏氨酸分不开肯定会造成影响。第三，杂峰是此起彼伏。第四，没有专门的单独标准品，只能用混合标准品来测定。无比的纠结。
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zhz1285
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2011/7/21 22:59:04 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主兄弟，你是给月旭做广告呢还是？
  你的谱图疑点太多，把异常的峰型掩盖的很好啊，能放大吗？
  还有就是你这16种氨基酸用很多方法处理么,得耗费多久时间？
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老多_小多
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2011/7/22 8:20:12 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
回8楼：出峰时间或者分不开，你得改善好你的梯度程序，因为测定的组分多，所以程序设置有点复杂，至于单独的标准，如果你没有，你可以用生化级氨基酸试剂来做标准定位，试剂便宜嘛
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