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主题：【第六届原创】乳制品中黄曲霉毒素M1的检测

浏览0 回复27 电梯直达
嘟嘟妮小贝
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发表于：2011/12/31 14:51:53 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
维权声明：本文为iamliutingting原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。
最近黄曲霉毒素M1闹得沸沸扬扬，这一检测也推向了高潮，我们公司也加强的检测，现在把分析方法跟大家分享一下：
方法是采用酶标法进行检测，
试验所需试剂、仪器、设备：
1、Bescon 黄曲霉M1测试试剂盒


试剂盒中的内容

2、去离子水
3、量筒
4、移液枪（200ul和200ul八道移液枪）
5、吸水纸
6、酶标仪


样品处理：
牛奶样品（稀释20倍）
1、取牛奶样品，用冷冻离心机（3000r/min，10℃）离心10分钟去除脂肪；

上图：处理样品所使用的冷冻离心机
2、离心后去下层脱脂牛奶100ul到1.9ml去离子水中混匀；
3、取100ul进行分析。
样品检测：
1、开始实验前要求试剂及样品达到室温，把洗液按照1:9的比例用去离子水稀释；

上图：稀释后的样品


上图：稀释后的全部样品

2、取适量的空条固定在微孔板架上；
3、加入100ul的样品溶液及标准液到对应的微孔中；

上图：步骤2、3

4、轻轻混合30s，室温下孵育30min；
5、加入100ul的酶标记物至每个微孔中；

6、轻轻混合30s，室温下孵育15分钟；
7、倒掉微孔中溶液，微孔中注满清洗液（200ul），然后倒掉，重复3次，共4次洗板；

8、最后一次清洗完后，倒掉空中溶液，然后翻转微孔板在吸水纸上拍干（一定要拍干，否则影响实验结果）；

9、每孔中加入100ul的底物溶液，室温下孵育30min；
10、每孔中加入100ul停止液，450nm读取吸光度值。
结果判断：
需要以标准的吸光率为X轴，标准浓度的半对数为Y轴绘制曲线图，计算出标准曲线，根据样品的吸光率，带入标准曲线，得到相应的样品浓度。已经在excel中做了相应的公式，只要将检测结果的OD值输入，即可得到检测结果。
附件：
AFM1自动计算软件.rar
该帖子作者被版主 天天洗碗加 5积分， 2经验，加分理由：鼓励原创
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薄荷草
peppermintgrass
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2011/12/31 15:22:03 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 嘟嘟妮小贝(iamliutingting) 发表:
为什么上传不了图片？

还是上传不了吗？
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去年冬天
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2011/12/31 15:35:28 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
了解一下检测方法，有没有快速的检测方法呢
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初学者&九点虎
zhouyuhu
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2011/12/31 23:17:07 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有一张没带手套哦，最好全程带上，注意安全
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嘟嘟妮小贝
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2012/1/1 9:26:12 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
哈哈，没戴手套那张是我，别人在做实验，我只是全程跟拍而已，哈哈。
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tangtang
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2012/1/1 9:28:41 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
与液相法相比，有没有优势？
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初学者&九点虎
zhouyuhu
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2012/1/2 9:50:29 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
领导不用带手套啊，哈哈
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嘟嘟妮小贝
iamliutingting
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2012/1/2 11:47:08 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不好意思，我们没有用液相做过，没有对比。
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天天洗碗
binglang1985
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2012/1/2 20:22:05 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
怎样避免假阳性的可能？
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angrboda
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2012/1/3 12:19:27 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
和液相相比，大概就是成本低，效率高。
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abcdefghijkl123
abcdefghijkl123
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2012/1/4 7:05:22 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看来实验方法不难的
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