主题:【第六届原创】高效液相色谱双波长检测的优势

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houjjun
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高效液相色谱双波长检测的优势



    下面我们就重点介绍下样品中多种化合物检测(最佳检测波长不一样)波长选择的问题(其它色谱条件必须一样)
    每种化合物单独检测波长选择肯定是没问题的,选择最佳检测波长一般来说是最好的。
    样品中多种化合物同时检测,每种化合物的最佳检测波长往往是不一样的,选择检测波长一般有两种方法。一是选择一个能兼顾每种化合物的检测波长;另一种方法是采用多波长检测。
    下面就以具体的检测为例来介绍。

    首先介绍下检测具有解肌清热、止泄止痢之功效的葛根芩连微丸中葛根素和黄芩苷。

葛根素检测

色谱条件

检测器:紫外检测器
检测波长:254 nm
色谱柱:Pgrandsil STC C18(250 X 4.6mm,5um)
流动相:甲醇:水(含0.2%磷酸)
流速:1.0mL/min
柱温:30℃
进样量:10ul
梯度洗脱
10ug/ml葛根素标准品色谱图:


黄芩苷检测

色谱条件
检测波长:315 nm

其它色谱条件不变
10ug/ml黄芩苷标准品色谱图:


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吕梁山
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有PDA检测器就足够了,可以提取紫外范围内的任意波长
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houjjun
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PDA检测器这方面是好,但它有一个不如紫外的特点,它的灵敏度没有紫外的高,而且现在由于买的少,价格也较高
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有PDA检测器就足够了,可以提取紫外范围内的任意波长
PDA检测器这方面是好,但它有一个不如紫外的特点,它的灵敏度没有紫外的高,而且现在由于买的少,价格也较高
也只是低半个数量级,一般的检测实际上区别不大
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土老冒豆豆
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假如没有PDA检测器,只是紫外检测器,那么液相有实现这种不同时间切换不同波长的程序控制功能吗?如果没有,就只好如楼主所说的,一个混合样品溶液在这个波长里进一针,在那个波长里进一针,就比较费事了。
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xiaoxu
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有PDA检测器就足够了,可以提取紫外范围内的任意波长
好是好 但并不是每个实验室都能实现
xiaoxu
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有PDA检测器就足够了,可以提取紫外范围内的任意波长
PDA检测器这方面是好,但它有一个不如紫外的特点,它的灵敏度没有紫外的高,而且现在由于买的少,价格也较高
也只是低半个数量级,一般的检测实际上区别不大
灵敏度个人感觉完全够用
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这个是针对标准品,假如样品呢??比如,葛根素和黄芩苷样品,样品中葛根素选择245nm,但是,假如在315nm的时候,样品中的某些杂质刚刚好在黄芩苷出峰时间的一样的峰,结果会不会影响??是不是需要做一个方法验证。
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houjjun
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假如没有PDA检测器,只是紫外检测器,那么液相有实现这种不同时间切换不同波长的程序控制功能吗?如果没有,就只好如楼主所说的,一个混合样品溶液在这个波长里进一针,在那个波长里进一针,就比较费事了。
现在的紫外检测器大多多有时间波长功能,只有一小部分没有。多通道检测的紫外现在还不多
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houjjun
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有PDA检测器就足够了,可以提取紫外范围内的任意波长
PDA检测器这方面是好,但它有一个不如紫外的特点,它的灵敏度没有紫外的高,而且现在由于买的少,价格也较高
也只是低半个数量级,一般的检测实际上区别不大
灵敏度个人感觉完全够用
那主要是不是价格高的问题了,并且PDA检测器国产的还没有或是性能还不行
xiaoxu
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原文由 孟(xmyichenrhm) 发表:
这个是针对标准品,假如样品呢??比如,葛根素和黄芩苷样品,样品中葛根素选择245nm,但是,假如在315nm的时候,样品中的某些杂质刚刚好在黄芩苷出峰时间的一样的峰,结果会不会影响??是不是需要做一个方法验证。
这个就有难度了
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